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目的:
本实验应用改良夹尾刺激法制造功能性消化不良肝郁脾虚模型,通过胃痛消痞方与西沙必利治疗效果的比较,探讨胃痛消痞方对功能性消化不良(funaional dyspepsin,FD)大鼠血清及胃窦、十二指肠组织中胃泌素(GAS)和生长抑素(SS)的影响。
方法:
一、分组及制作动物模型
40只wistar大鼠采用随机数字表方法随机分为正常对照组、模型组、胃痛消痞方、西沙必利组。除正常对照组大鼠外,其他各组均通过改良夹尾刺激法建立FD大鼠模型,每日用长海绵镊子钳夹大鼠尾巴末端1/3处,以令其尖叫挣扎但不破皮为度(如有抓伤破皮,则用0.5%碘伏消毒受伤部位,以防感染),使其暴怒并与其他大鼠撕打,每次持续30min,每日2次,连续刺激3wk.造模期间,各组大鼠自由进食及饮水.大鼠出现躁动等紧张、焦虑反应,且进食量明显减少,即为造模成功。
二、灌胃治疗
中药组每日给予胃痛消痞方9g/kg,西药组每日给予含有2mg/kg的西沙必利,模型组及正常组给予灌服等量蒸馏水,每日1次灌胃,持续3wk。
三、ELISA法检测血清中GAS、SS的含量
在给药第21天,禁食不禁水药12h,麻醉处死全部大鼠,心脏取血,分离血清,置于-20℃冻存待测,ELISA法检测血清中GAS、SS的含量。
四、免疫组化检测胃肠组织中GAS、SS的表达水平
每只大鼠取胃窦部组织(定位于距幽门胃端、肠端各0.5cm处,连同幽门一起取出)约100mg,用免疫组化方法检测胃肠组织中GAS及SS表达水平。
结果:
一、动物模型建立成功
夹尾刺激过程中,逐渐引发大鼠相互间撕打,先后出现进食量减少,烦躁、易怒,大便塘稀,排泄物秽臭,毛色枯稿,光泽减少,反应迟钝等变化。
二、各组干预对大鼠血清及组织中GAS含量的影响:
ELISA测定大鼠血清GAS含量,结果显示与对照组(413.68±21.99ng/L)相比,模型组大鼠血清Gas含量明显减低(234.51±18.85ng/L);经中西药干预治疗后,与模型组相比,GAS含量均明显增高,分别为386.30±23.31ng/L及353.91±21.63ng/L,中药组GAS含量显著高于西药组,差异有统计学意义(P＜0.05);各治疗组均低于正常对照组(P＜0.05)。
免疫组化检测胃及十二指肠组织中,中药组GAS表达水平显著高于西药组(P＜0.05):各治疗组GAS表达均低于正常对照组(P＜0.05),但高于模型组(P＜0.05);.
三、各组干预对大鼠血清及组织中SS含量的影响
EUSA测定大鼠血清中SS含量,与对照组(78.16±7.58pg/ml)比较,模型组大鼠血清ss含量显著增高(141.43±13.19pg/ml);经中西药干预后,与模型组相比,SS明显下降,分别为87.43±6.30pg/ml及102.28±10.06pg/ml,中药组SS含量显著低于西药组,有统计学意义(P＜0.05);各治疗组SS含量均高于正常对照组(P＜0.05)。
免疫组化检测胃及十二指肠组织中,中药组SS表达水平显著低于西药组(P＜0.05):各治疗组SS表达均高于正常对照组(P＜0.05),但低于模型组:
结论:
1.功能性消化不良可以引起大鼠GAS、SS水平改变。
2.胃痛消痞方可以提高FD大鼠血清及胃窦、十二指肠组织中GAS含量,降低SS含量。