γ射线联合肉桂精油对腐败希瓦氏菌的作用机制研究

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水产品因蛋白质含量丰富、组织质地脆弱,极易受到微生物的作用而腐败变质。腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)是一种典型的水产品特定腐败菌,其腐败活性较强,能产生H2S,还原氧化三甲胺(TMAO)等。寻求安全有效抑制水产品中特定腐败菌等微生物生长,保证水产品品质的新技术和新方法,是当前水产品保鲜行业研究的重点,具有重要的经济和社会意义。本文首先研究了肉桂精油、γ射线和两者联合作用对接种S.putrefaciens黑鱼微生物的抑制和品质的维持作用,进一步分析了γ射线和肉桂精油联合作用对S.putrefaciens细胞活性的抑制和对细胞膜的作用效果,观察了肉桂精油主成分在S.putrefaciens胞内外的迁移和变化规律,探究了γ射线和肉桂精油联合作用对S.putrefaciens的作用机制。主要研究内容及结果如下:(1)研究了肉桂精油、γ射线和两者联合作用对黑鱼肉冷藏品质的影响。肉桂精油和γ射线辐照对黑鱼块中的S.putrefaciens具有较强的抑制作用,随着精油浓度和辐照剂量的提高其抑菌活性显著增强(p<0.05)。在整个贮藏期内,γ射线和肉桂精油联合处理组能使得黑鱼肉的菌落总数(APC)、挥发性盐基氮(TVB-N)、硫代巴比妥酸值(TBARS)保持在较低的水平。因此,γ射线与肉桂精油的联合使用可有效抑制S.putrefaciens的腐败,保持黑鱼肉的品质。(2)研究了肉桂精油、γ射线和两者联合作用对S.putrefaciens活性的抑制作用,肉桂精油最小抑菌浓度(MIC)为0.35μL/mL,辐照处理S.putrefaciens的D10为0.133 kGy。肉桂精油与辐照联合作用下,辐照对S.putrefaciens的D10随着肉桂精油浓度的增加而减少,相反地,S.putrefaciens对辐照的敏感度(RIS)随肉桂精油浓度的增加而上升,当肉桂精油浓度为0.35μL/mL时,S.putrefaciens的RIS值是单独辐照的2.38倍。同时比较了未处理(CK)、0.080 kGy辐照处理(G)、浓度为0.175μL/mL(C1)和0.35μL/mL(C2)以及0.175μL/mL精油与0.080 kGy辐照处理(C1+G)对S.putrefaciens细胞活性的影响,结果表明:辐照和精油联合作用对S.putrefaciens的抑制比其单独作用效果好,高浓度精油对细菌具有更好的作用。(3)研究了未处理(CK)、0.080 kGy辐照处理(G)、0.175和0.35μL/mL肉桂精油处理(C1和C2)精油以及0.175μL/mL肉桂精油与0.080 kGy辐照联合处理(C1+G)对S.putrefaciens细胞膜的作用效果。与C1和G相比,C1+G对S.putrefaciens细胞外部形态破坏更明显,S.putrefaciens胞内ATP下降和胞外ATP上升幅度更大,胞内pH值也下降更明显。C1+G对S.putrefaciens的膜蛋白影响更显著,使得40 kDa亚基减少,18 kDa亚基增加,且C1+G使S.putrefaciens细胞膜主要脂肪酸C14:0,C16:0,C16:1,C17:1,C18:1显著减少(p<0.05),因此,辐照和精油联合作用对S.putrefaciens的细胞形态和膜通透性的破坏力更强,使得膜蛋白亚基发生变化,膜上的脂肪酸含量减少,从而对细胞膜造成损害。(4)研究了肉桂精油的主要化学组分在精油和辐照联合处理S.putrefaciens胞内外的迁移和变化。结果表明:C1、C2和C1+G处理S.putrefaciens胞外的肉桂醛转化成了肉桂醇(p<0.05),C1、C1+G、C2处理前后S.putrefaciens胞内肉桂醛未发生显著改变,且低于相应的不添加S.putrefaciens的肉桂精油对照组(CC1,0.175μL/mL)和(CC2,0.35μL/mL)(p<0.05)。此外,C1+G处理肉桂醛的变化与C1相比无差异(p≥0.05)。综上所述,肉桂精油可能与S.putrefaciens产生发生相互作用,S.putrefaciens使肉桂醛转化成为肉桂醇,而肉桂醛抑制了S.putrefaciens的生长。
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