【摘 要】
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目的探讨靶向下调或增高Mps1表达对骨肉瘤细胞体外增殖、凋亡与转移的影响。方法应用Western blotting、qRT-PCR检测不同恶性程度骨肉瘤细胞系OS-732、U2OS及成骨细胞系hFOB1.19中Mps1、Mad1、Bub1、CyclinB蛋白和mRNA的基础表达水平。应用IHC检测骨肉瘤组织样本与正常骨组织中Mps1的表达情况。将高表达Mps1的骨肉瘤细胞系OS-732分为OS-7
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目的探讨靶向下调或增高Mps1表达对骨肉瘤细胞体外增殖、凋亡与转移的影响。方法应用Western blotting、qRT-PCR检测不同恶性程度骨肉瘤细胞系OS-732、U2OS及成骨细胞系hFOB1.19中Mps1、Mad1、Bub1、CyclinB蛋白和mRNA的基础表达水平。应用IHC检测骨肉瘤组织样本与正常骨组织中Mps1的表达情况。将高表达Mps1的骨肉瘤细胞系OS-732分为OS-732抑制组,si-Mps1 OS-732组和Over-Mps1 OS-732组,通过Western blotting、qRT-PCR检测各组细胞中Mps1、Mad1、Bub1、CyclinB蛋白和mRNA表达差异,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力。结果在骨肉瘤细胞系OS-732、U2OS中Mps1、CyclinB蛋白和mRNA的表达高于hFOB1.19(P<0.05),Mad1、Bub1蛋白和mRNA的表达低于hFOB1.19(P<0.05),且OS-732中Mps1及其他因子的蛋白和mRNA表达更高。OS-732抑制组,si-Mps1 OS-732组骨肉瘤细胞中Mps1、CyclinB蛋白和mRNA的表达降低(P<0.05),Mad1、Bub1蛋白和mRNA的表达升高(P<0.05),且细胞增值抑制率增高(P<0.05),细胞凋亡率增高(P<0.05),细胞迁移能力下降(P<0.05),而si-Mps1 OS-732组变化更显著。Over-Mps1 OS-732组表现出与OS-732抑制组,si-Mps1 OS-732组相反的结果(P<0.05)。结论骨肉瘤细胞系OS-732,U2OS中存在Mps1的高表达,且与骨肉瘤恶性程度呈正相关。靶向下调Mps1表达可抑制骨肉瘤细胞增殖和转移,促进细胞凋亡。Mps1表达缺失导致SAC作用失效,造成骨肉瘤细胞有丝分裂监视作用减弱而分裂错误积累,是靶向下调Mps1后造成OS-732增殖与转移受抑制,凋亡增加的主要机制。
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