叶酸水平对子宫内膜容受性及HOXA10基因甲基化水平的影响研究

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目的:子宫内膜异位症(EMs)是一种与不孕相关的女性常见疾病,HOXA10基因是内异症易感基因之一,叶酸是哺乳类动物生长发育过程中担负一碳单位传递的B族维生素,是合成人体DNA的必需维生素。叶酸作为人体内甲基基团的最终来源,在维持DNA甲基化中起着重要的作用。本研究旨在探讨血浆叶酸水平及DNMTs基因、HOXA-10基因与EMs不孕患者的子宫内膜容受的关系,以期为EMs不孕患者提高怀孕概率提供新的治疗方法。方法:选取2016-09至2017-09在常州市妇幼保健院生殖中心行IVF不孕患者30例为研究对象,所有纳入对象均进行腹腔镜手术以明确诊断病理。不孕原因为子宫内膜异位症15例纳入病例组(AFS分期:Ⅲ-Ⅳ期),不孕原因为输卵管因素者(行双侧输卵管结扎或造口术)15例为对照组。采用ELISA试剂盒检测两组患者的血浆叶酸水平和CA125含量;取排卵后7天子宫内膜组织,采用荧光定量PCR方法检测DNMTs、HOXA10基因mRNA的表达,采用BSP法检测HOXA10.基因甲基化在子宫内膜的表达水平。通过应用spss 22.0统计软件处理,单因素分析法对患者的一般资料进行分析。计数资料比较采用χ2检验;两两比较的计量资料先做正态性检验和方差齐性检验,方差齐用t检验,反之用近似t检验;多样本均数比较若符合正态分布采用方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)结果显示正常组患者的叶酸含量显著高于EMs患者血浆中的叶酸含量,两组患者的CA125无显著性差异;(2)结果显示HOXA10基因mRNA的表达水平在正常组中显著高于EMs组,DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达水平在正常组中显著低于EMs组;(3)结果显示EMs组的DNA甲基化与正常组患者相比,有显著性的差异,CpG点的平均甲基化水平在子宫内膜异常组(82%)显著高于正常组(57%),两组相比,有显著性差异;(4)相关性分析的结果显示患者体内叶酸的水平与内膜组织的甲基化显著相关,体内的叶酸含量越低,患者内膜的甲基化程度越高。结论:EMs患者HOXA10基因的表达较低,但是甲基化的概率却明显高于对照组,说明在EMs患者体内存在着HOXA10基因DNA异常甲基化,而这种异常的甲基化可能是引起患者发病或子宫内膜容受性下降的重要原因。EMs组叶酸水平与HOXA10基因呈现显著的正相关,且含量明显低于对照组。通过补充叶酸降低启动子区甲基化率来提高子宫内膜容受性并阻止EMs的进展或许可作为今后治疗新思路。
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