论文部分内容阅读
LEAFY(LFY)基因是拟南芥营养生长向生殖生长转变过程中的一个重要因子,对于成花诱导的启动是必需的,与FLOWER LOCUS T(FT)、FLOWERINGLOCUS D(FD)、SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS 1(SOC1)基因一起被认为是四条开花促进途径的整合因子,在整个成花调控网络中处于关键位点,但是具体的调控机理目前尚不完全清楚,本研究主要针对FT、FD、SOC1与LFY之间的调控机理进行研究。通过将35S::LFY植株杂交到ft10、fd3、soc1-2、fd3soc1-2突变体背景中,发现35S::LFY单生花的特异性表型消失而且开花时间相应地推迟。以往的研究显示FT、FD、SOC1在LFY的上游起作用,因此我们的结果说明了FT、FD、SOC1很有可能在转录后水平起作用,影响LFY产物的稳定性。通过进一步检测35S::LFY转基因植株在不同突变体背景下LFY mRNA表达水平的变化情况,发现在ft10背景下表达水平变化不大,而在fd3、soc1-2背景下表达水平降低很多,说明FD和SOC1对LFY mRNA的稳定性确实存在影响。同时为了研究FT、FD、SOC1对LFY蛋白的影响,一方面我们成功构建了带HA标签的超表达LFY转基因植株;另一方面成功在体外表达LFY蛋白,并提纯用于进一步的研究。在研究LFY与HA融合的过程中,发现LFY cDNA不同区域对LFY基因功能的影响不同,3’编码区和5’编码区对LFY基因的功能是必需的,而中间区域对LFY基因功能的影响较小。