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目的：检测免疫相关性全血细胞减少(immuno-related pancytopenia, IRP)患者自身抗体(IgG／IgM)在骨髓红系造血细胞及其他造血细胞膜上的作用靶点,探索IRP患者造血细胞膜上可能的靶抗原成分,为进一步纯化和克隆IRP患者自身抗原提供依据。方法：研究对象为66例初治IRP患者及28名正常对照。应用流式细胞术(FACS)检测骨髓红系造血细胞膜表面自身抗体与促红细胞生成素受体(EPOR)的数量,观察有核红细胞自身抗体阳性组与自身抗体阴性组IRP患者EPOR的表达水平；RT-PCR检测EPOR mRNA的表达水平；FACS分选骨髓红系造血细胞后,免疫印迹法检测Stat5及P-Stat5蛋白表达水平以观察EPO／EPOR信号通路是否受抑；利用甘氨酸缓冲液洗脱骨髓红系造血细胞膜上结合的自身抗体,重新标记后再次检测EPOR的表达水平；FACS检测骨髓造血细胞膜抗体,提取细胞膜蛋白,免疫印迹法检测IRP患者骨髓上清液中自身抗体IgG的阳性率,进而应用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合免疫印迹法分离和鉴定IRP患者自身抗体IgG在细胞膜上的靶抗原,并与正常对照及病例对照组进行对比；选取目标蛋白条带进行高压液相串联质谱(LC-MS／MS)分析以确定靶抗原成分。结果：1.(1)有核红细胞自身抗体阳性组IRP患者有核红细胞膜EPOR表达量为(1.59±0.87)%,明显低于自身抗体阴性组(4.58±4.09)%(P<0.01),后者则明显高于正常对照组(2.27±1.76)%(P<0.05)；IRP患者有核红细胞膜上EPOR表达水平与自身抗体呈显著负相关(r=-0.543,p=0.000),EPOR(Y)与自身抗体(X)的直线回归方程为Y=0.040-0.335X；有核红细胞自身抗体阳性组网织红细胞百分率为(1.55±0.64)%,显著低于自身抗体阴性组(2.41±1.42)%(P<0.05)；IRP患者有核红细胞膜上EPOR表达水平与其网织红细胞百分率呈显著正相关(r=0.346,p=0.029)；(2)有核红细胞自身抗体阳性组EPOR mRNA表达水平为(0.685±0.136),明显高于自身抗体阴性组(0.554±0.116)(P<0.01)和正常对照组(0.580±0.119)(P<0.05)；(3)有核红细胞自身抗体阳性组Stat5蛋白表达水平为(1.45±0.94),明显高于正常对照组(0.54±0.36)(P<0.05),而自身抗体阴性组Stat5蛋白表达水平为(0.75+0.69),与正常对照组无统计学差异(P>0.05)；自身抗体阳性组P-Stat5蛋白表达水平为(0.42±0.18),明显低于正常对照组(0.85±0.38)(P<0.05),而自身抗体阴性组P-Stat5蛋白表达水平为(0.70±0.18),与正常对照组无统计学差异(P>0.05)；(4)应用甘氨酸洗脱液洗脱抗体后自身抗体数量明显减少,而EPOR表达水平明显增高,提示部分自身抗体洗脱前封闭EPOR。2.IRP组骨髓上清液中IgG的阳性率为75%(15／20),明显高于病例对照组(0%)和正常对照组(10%,1／10)(均P<0.01)。在20例初治IRP患者中,其骨髓造血细胞膜上共有五种蛋白成分可被自身抗体IgG识别,其相对分子量分别为25-30kDa、47.5kDa、60-65 kDa、73 kDa和83 kDa,其阳性率分别为35%(7／20)、10%(2／20)、50%(10／20)、20%(4／20)、10%(2／20)。6例再生障碍性贫血(AA)患者及4例骨髓增生异常综合征(MDS)患者经免疫印迹法鉴定后均未发现细胞膜上有蛋白被自身抗体IgG识别。正常对照组可见相对分子量为90kDa和150kDa的蛋白被识别,其阳性率均为10%(1／10)。选取25kDa、30kDa和47.5 kDa蛋白条带进行高压液相串联质谱分析,发现G蛋白偶联受体156变异体及人红细胞带3蛋白胞内区域结晶体,P链两种膜蛋白成分。结论：部分IRP患者自身抗体可作用于骨髓红系造血细胞膜上的EPOR,封闭EPOR信号转导,导致红系较早阶段增殖和分化受到抑制。EPOR为自身抗体作用的靶点之一；IRP患者骨髓上清液中存在自身抗体IgG,可作用于骨髓细胞膜上多个靶抗原成分,质谱鉴定结果含G蛋白偶联受体156变异体及人红细胞带3蛋白胞内区域结晶体,P链两种膜蛋白成分。