二穗短柄草根中木栓质脂肪醇合成基因的克隆与功能验证

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuaiyu001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物根部木栓质在植物抵御各种生物和非生物胁迫中具有重要作用。二穗短柄草作为麦类作物重要的模式植物,研究其与抗旱相关基因和机理,可为小麦等重要作物的研究提供借鉴。本论文通过气相色谱质谱联用仪(GC-MS)和气相色谱(GC)分析了二穗短柄草根中木栓质的组成和含量及其变化特点。利用拟南芥木栓质脂肪醇合成酶基因AtFAR1的蛋白序列在二穗短柄草数据库中分别进行同源比对,对获得的同源序列进行生物信息学分析,确定出了二穗短柄草木栓质脂肪醇合成酶相关的候选基因;分析候选基因在不同组织的表达特征,从中选择重要的候选基因进行了克隆和功能验证。研究结果如下:  1. 二穗短柄草根中木栓质组成成分有初级脂肪醇、脂肪酸、ω-羟基脂肪酸和α,ω-二羧酸,物质组成与已经发表的拟南芥和其他物种的木栓质组成成分相似。但是在组成成分的含量上存在一定的差异。  2. 二穗短柄草基因组中存在6个候选基因,共编码6个蛋白质。氨基酸序列多重比对后显示,只有BdFAR4 (Bradi3g20000)与AtFAR1具有50%以上的氨基酸一致性, BdFAR1(Bradi4g38460) 、 BdFAR2(Bradi3g42780) 、 BdFAR3(Bradi4g37860) 、 BdFAR4 (Bradi3g20000)、BdFAR5(Bradi1g73877)和BdFAR6(Bradi4g37860)与AtFAR1的氨基酸序列一致性分别是40.34%、42.30%、45.20%、50.80%、35.61%和44%。通过生物信息学分析,推测这些基因可能具有合成初级脂肪醇的功能。前期我们已克隆了BdFAR1、BdFAR2和BdFAR3,并已证明BdFAR1、BdFAR2和BdFAR3参与二穗短柄草叶片表皮蜡质中脂肪醇的合成;而BdFAR4主要在根中表达。因此,我们推测BdFAR4可能参与二穗短柄草根中木栓质脂肪醇的合成。  3. 在酵母中异源表达BdFAR4基因表明,BdFAR4具有编码脂肪酰基辅酶A的功能。通过构建酵母表达载体,转化酵母与提取酵母产物检测后,我们发现相比于空载体,转化了目的基因的酵母菌株中合成了链长为C20和C22的脂肪醇。  4.在番茄中异源表达BdFAR4基因表明,转基因番茄T1代的根中木栓质脂肪醇的含量显著增加,其中以链长为C20和C22的初级脂肪醇增加最多。与空载体植株相比,转基因植株根中木栓质脂肪醇的含量明显增加了1.4-1.7倍,其中链长为C20的初级脂肪醇增加了1.3-1.8倍,链长为C22的初级脂肪醇增加了1.4-1.8倍。综上结果表明BdFAR4具有合成木栓质脂肪醇的功能,并且主要合成链长为C20和C22的初级脂肪醇。
其他文献
玉米叶片超氧物歧化酶(SOD)活性在各细胞器中的分布以细胞溶质部分最高,约占总活性的85%,叶绿体和线粒体部分各占13%和2%。土壤淹水使各细胞器SOD活性下降,叶绿体是受影响最敏感
一、多媒体技术的特点及关键技术1.多媒体技术的特点多媒体与人们经常接触到的媒主要不同之处在于:传统的传媒基本上是模拟信号,而多媒体所处理的信息却是数字化的;传统的传
利用GenBank上已公布的玉米T、C、S群不育细胞质线粒体DNA特异基因T-urf13、atp6-C、orf355的片段序列设计引物,经PCR扩增对新型雄性不育细胞质M5P型和YⅡ-Ⅰ型进行归群研究。
用紫外光(UR)、红外光(FR)、混合光(RB)、红光(R)和兰光(B)分别以不同距离和不同时间对柠条锦鸡儿种子进行的照射表明,UR和R照射的出苗率最佳,分别比对照提高48.0%和42.67%;RB
本研究选用10个小麦品种(系)为试验材料,采用幼苗生长测定和电导率两种方法测定种子发芽指标,采用分光光度法测定小麦种子的LOX活性,采用加速老化试验法处理籽粒,检测其发芽
In the edge detection of Remote Sensing (RS) image, the useful detail losing and the spurious edge often appear. To solve the problem, the authors uses the dyad
To obtain the recombinant soluble protein of the extracellular fragment of human TRAIL gene and to identify its function preliminarily, this gene fragment was a
利用外来种质是拓宽我国玉米种质遗传基础,解决遗传狭窄的重要途径。对改良系进行遗传研究,拓宽温带玉米的遗传基础,构建新的杂种优势模式,这将解决我国玉米育种徘徊不前的局面,克
2002-2004连续两年在河南省郑州市农科所试验场,以目前河南省大面积推广的优质强筋小麦品种国审豫麦34号为供试品种,在池栽条件下研究了不同肥料处理和不同灌溉处理对豫麦34号