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目的:建立大鼠失血性休克再灌注肝损伤模型,应用声触诊组织成像定量(Virtual touch tissue imaging quantification,VTIQ)与超声造影(Contrast-enhanced ultrasound,CEUS)技术定量评估雌二醇对失血性休克复苏期肝脏的保护作用,并分析VTIQ及CEUS定量参数与肝功能指标及酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)指标之间的相关性,探讨VTIQ与CEUS技术在评估药物干预失血性休克再灌注肝损伤中的应用价值。方法:随机将30只健康成年雄性SD大鼠分为假手术组(Sham组)、失血性休克再灌注损伤组(Hemorrhagic shock and reperfusion injury group,HS-RI组)及雌二醇组(Estradiol group,E组)。HS-RI组:于大鼠左侧颈部肌层深面气管旁分离出左侧颈总动脉,置入20 G留置针经三通管接生物血压传感器,记录原始平均动脉压(Mean arterial pressure,MAP)。然后于左侧腹股沟区分离出左侧股总静脉及股总动脉,分别置入24 G留置针。由左侧股总动脉放血至40%原始MAP维持1小时后再由左侧股总静脉回输复苏液,血压回升至80%原始MAP表明HS-RI模型建造成功。E组:大鼠放血至40%原始MAP维持1小时后,于皮下注射雌二醇1 mg/kg,余操作同HS-RI组。Sham组:对大鼠仅行左侧颈总动脉、股总动脉及股总静脉插管,不进行后续放血和补液操作。模型建立成功12小时后行VTIQ及CEUS检查。首先行VTIQ检查:采用西门子ACUSON S3000超声诊断仪,使用9L4变频线阵探头,在大鼠肋间扫查出清晰的肝脏二维图像后选择VTIQ质量模式,当质量模式最佳时调整为速度模式,将感兴趣区域置于肝脏同一深度的不同位置测量剪切波速度(Shear wave velocity,SWV)。VTIQ检查结束后于大鼠右侧腹股沟区分离出右侧股总静脉并置入24 G留置针,建立静脉造影通路。使用仪器和探头同VTIQ检查,向右侧股总静脉团注造影剂的同时启动内置存储器和计时器。采用ACQ定量分析软件对存储成功的造影动态过程进行分析,可获得时间强度曲线(Time‐intensity curve,TIC)图,及达峰时间(Time to peak,Tp)、平均渡越时间(Mean transit time,MTT)、曲线下面积(Area under curve,AUC)、峰值强度(Peak intensity,Peak)四个参数。三组SD大鼠均于超声造影结束后剖腹取下腔静脉血3ml,采用ADVIA 2400全自动生化分析仪检测离心后血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)的水平。取血成功后立即处死大鼠,迅速取大鼠右肝组织两份,分别用于苏木素-伊红染色和诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)含量的检测。采用SPSS 25.0软件包进行数据分析,服从正态分布的定量资料用“均数±标准差”进行统计描述,三组间各指标的比较采用单因素方差分析,绘制SWV预测大鼠急性肝损伤的受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积并获取截断值,用Pearson线性相关分析VTIQ及CEUS参数与ALT、AST、Bcl-2、IL-6、i NOS之间的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.VTIQ检测结果:与Sham组相比,HS-RI组及E组的SWVmin、SWVmax、SWVmean均增加(P<0.05)。与HS-RI组的SWVmin(3.02±0.38)m/s、SWVmax(3.83±0.17)m/s、SWVmean(3.51±0.22)m/s相比,E组的SWVmin(2.65±0.13)m/s、SWVmax(3.34±0.25)m/s、SWVmean(2.97±0.14)m/s均明显减小(P<0.05)。ROC曲线分析显示以SWVmean预测急性肝损伤的曲线下面积最大(0.990),其截断值为2.93 m/s,灵敏度为100%,特异度为90%。2.超声造影TIC图定量分析:采用ACQ软件对造影过程进行分析,获得TIC图,Sham组TIC图较HS-RI组和E组更快达到峰值,达峰后又迅速下降。E组TIC图较HS-RI组上升和下降均增快。与Sham组相比,HS-RI组Peak(58.87±2.91)%、AUC(11937.27±567.37)%s明显增加,TP(49.94±3.36)s、MTT(152.53±11.73)s明显延长(P<0.05);与Sham组相比,E组Peak(41.11±2.93)%减少,AUC(5690.75±348.15)%s增加,Tp(36.42±3.80)s及MTT(101.89±2.24)s延长(P<0.05);与HS-RI组相比,E组Tp、MTT缩短,Peak、AUC减少(P<0.05)。3.生化指标检测结果:与Sham组ALT(64.61±1.50)U/L、AST(133.31±12.44)U/L值相比,HS-RI组与E组ALT、AST值均明显增加(P<0.05)。与HS-RI组ALT(231.68±15.49)U/L、AST(903.29±36.08)U/L值相比,E组ALT(153.65±5.89)U/L、AST(621.58±8.58)U/L值明显降低(P<0.05)。4.病理结果:Sham组肝脏组织被膜未见明显增厚,肝细胞形态正常并且围绕中央静脉呈放射状排列;HS-RI组肝脏组织被膜增厚,伴肝细胞坏死及炎细胞浸润;E组与HS-RI组相比肝脏组织被膜轻微增厚,伴有少量肝细胞坏死及少量炎细胞浸润。5.ELISA检测结果:与Sham组相比,HS-RI组及E组i NOS、IL-6含量均增加,Bcl-2含量均减少(P<0.05)。与HS-RI组i NOS(24.75±1.00)ng/m L、IL-6(13.59±0.94)pg/m L、Bcl-2含量(25.60±1.19)ng/m L相比,E组i NOS(19.86±1.47)ng/m L以及IL-6(10.34±0.60)pg/m L含量减少,Bcl-2含量(34.22±1.12)ng/m L增加(P<0.05)。6.VTIQ参数与生化和ELISA指标的相关性分析:SWVmin、SWVmax、SWVmean与生化和ELISA指标之间均存在显著相关性(P<0.001),其中SWVmean与ALT、AST、Bcl-2、IL-6、i NOS呈高度相关(r=0.872;0.846;-0.857;0.828;0.865)。7.超声造影参数与生化和ELISA指标的相关性分析:除Peak与AST的相关关系无统计学意义外,其余造影参数与生化和ELISA指标的相关关系均有统计学意义(P<0.05)。其中AUC、MTT与ALT、AST、Bcl-2、IL-6、i NOS均呈高度相关,r分别为(0.928;0.896;-0.954;0.916;0.862)和(0.970;0.973;-0.978;0.948;0.863)。结论:1.VTIQ技术能够评估失血性休克复苏期肝脏组织的硬度变化以及评估预防性用药的效果,SWVmin、SWVmax、SWVmean均具有一定的参考价值。2.CEUS能够监测失血性休克复苏期急性肝损伤的微循环灌注异常,并能发现雌二醇干预后急性肝损伤灌注改变,其中Tp、AUC、MTT三个指标具有一定的参考价值。3.VTIQ及CEUS定量参数与生化及ELISA指标具有显著的相关性,并且其变化能够反映肝脏HS-RI程度。4.VTIQ与CEUS技术为临床发现失血性休克复苏期急性肝损伤的发生以及药物干预后的疗效评估提供了新的较为敏感的检测方法。