蛹虫草子实体多糖提取及功能活性研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 19次 | 上传用户:jinshuxian
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蛹虫草是一种食药两用真菌,备受科学家的关注,蛹虫草多糖是蛹虫草中最重要的活性成分之一。近年来,蛹虫草多糖的抗肿瘤、抗氧化和免疫调节作用等功能活性逐渐被人们认知,已经成为目前科学家研究的焦点。本文研究了利用超声波辅助水提法提取蛹虫草子实体多糖的工艺、粗多糖的分离纯化以及蛹虫草子实体多糖抗肿瘤、抗氧化和抗衰老的功能活性。试验研究结果如下:1.以超声波频率、功率、时间、温度、加水倍数和蛹虫草子实体粉末粒度为单因素的基础上得出提取功率、提取时间、提取温度和加水倍数为影响提取率高低比较突出的因素,以这四个因素作为研究对象,通过响应面试验得到提取蛹虫草子实体多糖的最优工艺条件为:当提取功率为220.258w,提取时间为50.244min,提取温度为70.564℃,加水倍数为30.998倍时,能获得最佳提取率的理论值是7.174%。2.对蛹虫草子实体粗多糖依次进行超滤浓缩、Sevag法脱除蛋白质、AB-8大孔吸附树脂脱色和透析袋透析之后,再利用DEAE-52纤维素阴离子进一步洗脱纯化,得到两组分F1、F2。其中F2组分含量很高,是蛹虫草子实体多糖的主要成分,也被称为酸性多糖,是活性多糖。分别收集这两种组分,利用葡聚糖凝胶G-100进一步纯化,分别得到了单一峰,表明此多糖的两个组分均为单一多糖。3.利用MTT法进行了体外抗肿瘤试验,结果表明蛹虫草子实体多糖具有一定的抗肿瘤效果,当酸性多糖(F2)浓度为2500ug/mL时,黑色瘤A-375细胞抑制率达到31.65%;当酸性多糖(F2)浓度为2000ug/mL时,肝癌HepG2细胞的抑制率达到27.9%。4.利用体外抗氧化试验,研究了多糖对羟自由基清除率、超氧阴离子的清除率以及多糖的还原力,结果表明,蛹虫草子实体多糖具有良好的抗氧化功能。当多糖浓度为25mg/mL时,羟自由基的清除率达到70%以上,超氧阴离子的清除率达到75%,并且随着浓度的增加,其清除率有不断上升的趋势。当多糖浓度为20mg/mL时,在700nm下的吸光值为1.068,表明蛹虫草子实体多糖具有良好的还原能力。5.在抗衰老试验中,用60只ICR小鼠随机分为六组,每组10只,建立D-半乳糖衰老模型小鼠试验,并灌胃不同浓度梯度的蛹虫草子实体多糖42天后,脱颈椎处死,以小鼠的免疫器官,肝脏组织、血清的SOD酶活力、GSH-PX酶活力以及其MDA的含量为衡量指标。最终通过方差分析的结果表明其抗衰老效果以中剂量(400mg多糖/Kg小鼠体重)最佳。
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