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目的探讨流式细胞术(FCM)与序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)检测人类白细胞表面抗原-B27(HLA-B27)在强直性脊柱炎(AS)中的诊断价值;观察HLA-B27等位基因亚型在本地区的分布情况;了解免疫系统在AS发病过程中的作用机制。方法通过病例回顾性分析,了解HLA-B27检测人群的基本情况,探讨FCM法检测HLA-B27对AS的诊断价值;采用PCR-SSP法和FCM法检测AS患者组、疑似AS患者组和健康对照组的HLA-B27,并对HLA-B27等位基因亚型进行分型鉴定,使用SPSS17.0统计软件对结果进行统计分析;通过受试者工作特征(ROC)曲线对两种检测方法进行方法学评价;对分组病例进行淋巴细胞亚群绝对计数和相关细胞因子的检测,采用独立样本t检验和方差分析对数据进行统计分析,探讨免疫系统在AS发病过程中的作用机制。结果1.246例疑似AS就诊患者的年龄主要集中在21~55岁之间,共确诊AS患者42例,其中HLA-B27阳性患者28例,占确诊人数66.7%。FCM法检测HLA-B27 ROC曲线下面积(AUC)为0.758(95%CI为0.659~0.856),由图得到的最佳cut-off值为147.5,在此临界点,敏感度为66.7%,特异度为89.7%,约登指数为0.564。2.三组资料中PCR-SSP法共检出HLA-B27阳性患者45例,其中B*2701型1例;B*2702型5例;B*2704型28例;HLA-B*2705型11例。PCR-SSP法和FCM法检测HLA-B27的ROC曲线下面积分别为0.913、0.884;PCR-SSP法的灵敏度、特异度分别为94.1%、84.0%;FCM法的灵敏度、特异度分别为64.7%、88.0%。3.AS组与健康对照组相比CD4+T淋巴细胞绝对计数值明显升高;CD8+T淋巴细胞和B淋巴细胞绝对计数值均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);AS组较疑似AS组相比,CD3+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞绝对值低于疑似组,差异有统计学意义,其他指标差异无统计学意义;疑似AS组与健康组进行比对得到疑似组CD3+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞绝对值明显低于健康对照组的结果,差异具有统计学意义,其他指标差异无统计学意义。4.AS组TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17表达水平较健康对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4水平较健康对照组明显降低,差异有统计学意义;IL-2、TGF-β1水平较健康对照组有上升趋势,但无统计学意义。AS组各细胞因子水平较疑似组相比TNF-α、IFN-γ、IL-17明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),其他因子差异均无统计学意义。疑似组较健康对照组除TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17升高,IL-4水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05),其他因子表达水平无明显差异。结论1.内蒙古地区强直性脊柱炎患病情况和全国情况基本一致,发病人群主要集中在青壮年男性;FCM法在检测HLA-B27时具有良好的稳定性,但灰区样本比例高,给临床检验工作带来一定困扰。2.PCR-SSP法检测HLA-B27对AS的诊断效能明显优于FCM法,PCR-SSP法检测HLA-B27是未来发展的趋势;内蒙古地区HLA-B27等位基因主要以B*2704和B*2705为主。3.AS的发病与免疫系统作用密切相关,尤其是CD4+T淋巴细胞在AS疾病发展过程中起主导作用,可进一步深入研究。4.TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10与AS的疾病进展显著相关;TGF-β1、IL-2不是影响疾病进展的主要因子;IL-17参与致病,对临床判断疾病发展有一定指导意义,此外,IL-17可能会为未来治疗AS提供帮助。