基于微流控芯片的人淋巴细胞捕获关键技术研究

来源 :国防科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:syscom
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
金壳磁珠作为近几年纳米生物传感研究的热点,由于其突出的磁富集效应已经广泛应用于细菌、细胞、DNA的分选及捕获。此外在固态基底表面蒸镀金膜后同样也可以完成淋巴细胞的捕获。微流控芯片作为高通量、微型化的分析检测平台,能够以可控并且可重复性操作的模式开展细胞的捕获及分析实验,在淋巴细胞检测领域具有非常广阔的应用前景。论文的主要研究内容如下:(1)概述了金壳磁珠和固态基底的制备方法,采用溶剂热法制备了粒径在400600nm的超顺磁性微球以及超声辅助羟胺种子生长法制备了金壳磁珠,采用真空镀膜法制备了金膜固态基底。概述了金壳磁珠的制备方法并借鉴文献对金壳磁珠的制备方法做了详细的论述。利用溶剂热法,调整实验参数探索了磁性微球(400600nm)的可控制备,为后续的细胞捕获奠定坚实的基础。利用本课题组之前提出的超声-羟胺种子生长法,成功制备了尺寸和形状方面具有良好均一性的金壳磁珠。并且运用TEM、SEM、EDS、XRD、UV-vis、磁强计等设备对制备得到的样品进行表征。此外制备的金壳磁珠也具有良好的SERS增强。根据实际需要,在磁性内核外面生长不同厚度,连续性完整的金壳。这种制备金壳磁珠的方法较传统的制备方法具有反应时间快、粒径均一性、表面包覆性好,实验操作简便等优点。采用真空镀膜技术,制备了蒸镀有约为200nm厚度金膜的固态基底。(2)用制备的金壳磁珠和固态基底为载体,对人外周血淋巴细胞进行捕获。表面偶联CD3抗体的金壳磁珠与人外周血中淋巴细胞表面的CD3抗原发生特异性反应,再结合金壳磁珠的磁响应,实现淋巴细胞的捕获。首先通过梯度离心分离法,将已分离的人外周血淋巴细胞进行捕获实验,验证实验可行性。随后通过对孵育条件、细胞浓度等条件的调整,优化捕获效率;进而采用人外周血样品。实现淋巴细胞的捕获。本文报道了一种稳定、高特异性的基于固态基底的人外周血淋巴细胞的分选及捕获。通过真空镀膜技术在硅片表面蒸镀一层200nm的金膜,在金膜表面自组装后偶联抗体,利用抗体抗原特异性反应,将淋巴细胞分选并且捕获固定在固态基底上。采用此种捕获方法可以将淋巴细胞直接捕获于一定面积的固态基底上,这样可以直接将淋巴细胞的个数具体化。(3)研究微流控芯片的驱动方式和制备工艺,设计了一种“Y”型结构的微流控芯片用于淋巴细胞的捕获。首先介绍了现有微流控芯片流体流动的驱动方式,根据相关流体力学相关理论,设计了一种“Y”型结构的微流控芯片,通过旋涂、光刻、显影等工艺制备了SU-8胶阳膜,然后采用浇注、固化和键合等工艺完成了微流控芯片的制备。研究了工艺参数对微流道制备的影响并且优化工艺参数,并且成功实现了金壳磁珠在微流控芯片内的可控驱动。(4)搭建了一个完整的淋巴细胞捕获平台,实现了淋巴细胞在微流控芯片内的捕获。首先,针对淋巴细胞的捕获,搭建了一套由微流控芯片、微量注射泵、体视显微镜构成的捕获平台。首先将淋巴细胞通入微流控芯片内,调整实验参数,提高细胞捕获效率并探究捕获浓度极限。另外还采用制备有固态基底的微流控芯片实现人外周全血淋巴细胞的捕获。
其他文献
本文在前人研究的基础上,以繁峙岩山寺文殊殿所表现的佛传图像为内容,从图像题材内容和表现形式两个角度展开讨论,希望对文殊殿佛传图像表现形式有一定把握,并期望得出岩山寺
固态硬盘是现今实现高速存储的重要存储器,其在安防监控,医疗设施,直播互娱,移动电子设备等领域中有广泛的应用。固态硬盘的性能与寿命指标是其是否能够占据市场的关键性因素
靳家彦,全国著名语文特级教师,小语界“四大名师”之一,“导读式教学”的创立人之一。在从教的40多年中,靳家彦一方面坚持投身于小学语文课堂教学实践,另一方面还致力于语文
笔者于2019年5月1日在唐山抗震纪念馆为一位美国游客提供了解说词口译服务。本报告是对此次解说词口译实践的分析和总结。本次解说词口译主要以介绍唐山大地震为主,也涉及近
本翻译实践报告是基于《澳大利亚经济》一书第五章的翻译实践撰写而成。全书对澳大利亚的经济概况、经济发展的历史与前景进行了梳理,其中的第五章节详细阐述了澳大利亚国际
水彩画自西方传播到中国,经历了中国传统思想文化的洗礼,并将中国本土绘画精髓与西方绘画优势相融合形成了具备东方特色的中国水彩画。吕品是山东著名的水彩艺术家和水彩教育
学位
随着知识产权强国战略的实施,我国已经是专利权申请大国。但与此形成对照的是,目前我国的专利技术成果转化率不高,科学技术对生产力的贡献率并没有充分发挥出来。因此,为提高
目的:多发性骨髓瘤SET结构域蛋白(multiple myeloma SET domain,MMSET)又名WHSC1或NSD2,是一种组蛋白甲基转移酶,主要与人类胚胎发育等生理过程密切相关。国内外研究显示MMSET在多种癌症中过表达且与患者的不良预后相关。本研究探讨MMSET基因在卵巢癌中的表达及基因沉默对卵巢癌细胞侵袭迁移能力的影响。研究方法:分别应用RT-PCR法、Western Blot法
信息技术在近些年来得到快速发展。在通讯领域,5G,wifi6等技术不断研发和创新;在应用领域,虚拟现实、工业控制、多媒体技术在我们的生活中广泛使用;在存储领域,基于闪存的固