芦笋立枯病拮抗木霉菌的筛选及防效研究

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本试验对芦笋立枯病进行分离和鉴定,从4个哈茨木霉菌株中,筛选出对芦笋立枯病具有较强拮抗作用的哈茨木霉菌株TH,分析了哈茨木霉TH拮抗机理、生物学特性和防病促生作用,以期对芦笋立枯病的生物防治提供理论依据。试验研究结果如下:1.经田间调查,症状识别、致病性检测及病原菌形态鉴定,并进一步的通过rDNA-ITS区段的PCR扩增、测序,并在GenBank中进行Blast搜索和比对分析。根据rDNA-ITS序列分析结果确定所分离的芦笋立枯病病原菌鉴定为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)。通过平板对峙法,TD、TH、TM、TX哈茨木霉菌株中筛选出对立枯病具有较强拮抗的哈茨木霉TH。2.研究了哈茨木霉TH对芦笋立枯病的拮抗作用机理,结果表明,其拮抗作用与抗生作用、重寄生作用和代谢产物的产生有关。另外,对哈茨木霉TH产酶能力的分析,虽然没有蛋白酶产生,但其可以分泌几丁质酶和纤维素酶。3.研究了哈茨木霉TH发酵液对芦笋立枯病抑菌的生物学特性的结果表明:哈茨木霉菌TH发酵液对不同温度的影响具有较高的稳定性,在60℃的温度处理后其对立枯病的抑菌率仍能保持在50%以上。在pH3.0~9.0范围内,哈茨木霉TH发酵液能保持其活性。NaCl、H2O2处理对哈茨木霉TH发酵液活性的处理对其抑菌的活性有一定影响,0~6g/L维生素C处理对哈茨木霉TH发酵液的抑菌效果影响很小。4.与50%多菌灵的防效相比,哈茨木霉TH原液108cfu/mL、稀释2倍、5倍和10倍处理的防效达到36.05%~63.96%,其中稀释5倍液的防治效果较好,防效为63.96%。哈茨木霉TH通过激活芦笋苗根系的SOD、POD、CAT、MDA、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的酶活,对芦笋苗根系产生了诱导抗病作用。5.哈茨木霉TH不同稀释倍数处理对芦笋幼苗的株高、干鲜比、干鲜重根冠比、根系活力均较对照显著增加。哈茨木霉TH不同稀释倍数处理促进了芦笋苗根系对大量元素的P、K的吸收,从而促进了芦笋苗的生长。本试验以形态学分析为基础,在分子水平上鉴定了引起芦笋的立枯病病原真菌,筛选出对芦笋立枯病具有较强拮抗的哈茨木霉菌株TH,通过对哈茨木霉TH拮抗机理、生物学特性及苗期防病促生作用的研究,对进一步揭示哈茨木霉介导的芦笋真菌病害生物防治具有重要意义。
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