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目的：通过观察健脾理气中药对肝癌微环境中调节性T细胞(regulatory T, Treg)的影响,探讨健脾理气中药调节肝癌免疫微环境的Treg细胞的机制。方法：1.分组造模：(1)选6周龄雄性清洁级Wistar大鼠60只,体重140g±10g,随机分为正常空白组、对照组、健脾理气组3组,每组20只。同一组每5只大鼠分为一笼,标记鼠笼。(2)正常组大鼠正常喂养饲料和饮水；对照组和健脾理气组大鼠一直自由饮用80ppm二乙基亚硝胺(DEN)水溶液。自造模后第16周起进行治疗,健脾理气组用健脾理气中药(由党参10g、茯苓20g、白术20g、淮山20g、陈皮10g、柴胡10g、白芍10g、枳实10g、甘草10g等九味中药组成,采用标准的水煎醇沉工艺加工成含1g生药／ml,4℃冰箱保存备用)混合于颗粒饲料中喂养,大鼠日摄取剂量约为人类公斤体重的10倍。对照组大鼠继续按原方式喂养。2.标本采集和制作：实验满20周称大鼠体重,脱颈处死大鼠。大鼠处死后剖开腹腔,剪取整个肝脏,记录一般情况及肝内癌结节数及大小,称肝质量,在无菌条件下分别制备正常组大鼠肝脏标本,对照组和健脾理气组大鼠肝脏内癌组织(同时有多个癌结节则取其中最大者)、癌旁组织(距离癌组织3mm内的组织)及癌远端组织(距离癌组织1cm外的组织)标本,分别用10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切取4um厚的切片,苏木素衬染色,热水蓝化,吹干后,树脂封片。免疫组化法检测大鼠肝组织中Treg细胞及CD4+T、CD8+T细胞。较好的标本照相留存。结果：1.健脾理气中药干预的大鼠肝癌模型在体重下降(P=0<0.01)和肝重增加方面(P=0.021<0.05)均不如对照组大鼠明显,且肝内癌结节个数较对照组大鼠少(P=0.011<0.05),所形成的肿瘤较对照组大鼠小(P=0.026<0.05)。2.通过免疫组化检测,健脾理气中药组大鼠肝癌微环境中Treg细胞数量较对照组大鼠肝癌微环境中少(P=0.0072<0.01),CD4+T细胞数量较对照组大鼠增加(P=0<0.01),对肝癌微环境中CD8+T细胞数量则无明显影响(P=0.527>0.05)。结论：健脾理气中药能够延缓肿瘤生长、增殖的机制之一可能是通过减少微环境中Treg细胞数量,提升CD4+T细胞数量,改善微环境中免疫抑制状态来实现。