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目的:探讨松果菊苷改善大鼠生精功能障碍的作用,为松果菊苷在促进生精功能方面的应用提供理论基础。方法:体内实验,60只Wistar雄成年性大鼠正常饲养5天后,称重后随机分成6组(每组10只:正常组、模型组、阳性对照组、松果菊苷25mg/kg剂量组(ECHL组)、松果菊苷50mg/kg剂量组(ECHM组)、松果菊苷100mg/kg剂量组(ECHH组)。除正常组外,其余各组大鼠腹腔注射醋酸铅连续7天,每三天称重一次,按体重给药(给药剂量为25mg/kg),制备醋酸铅中毒模型。造模成功后,阳性药物组给予维生素C 100mg/Kg·d灌胃,松果菊苷低、中、高分别给予25 mg/kg、50mg/kg、100 mg/kg松果菊苷灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续30天。末次灌胃后24h,用10%的水合氯醛麻醉大鼠(根据大鼠的体重按照0.3mL/100g剂量注射),取附睾检测精子存活率、活力、畸形率。取左侧睾丸检测SOD、LDH、GSH含量。蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测睾丸组织中激活MAPK信号通路的关键蛋白(包括JNK、p-JNK、p38、p-p38)的表达变化。取大鼠右侧睾丸组织做HE染色,观察大鼠睾丸组织学变化。体外实验,用400μmol/L过氧化氢作用于小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)4小时,制备过氧化氢损伤的细胞模型。在细胞培养液中松果菊苷终浓度分别为50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L设立松果菊苷低、中、高剂量组,待松果菊苷作用TM3细胞24小时后用MTT法检测加入不同浓度的松果菊苷对TM3活力的影响。通过LDH、GSH-PX、T-AOC试剂盒检测不同浓度松果菊苷作用下TM3细胞内氧化应激的指标变化情况,WB检测TM3中激活MAPK信号通路的关键蛋白(包括JNK、p-JNK、p38、p-p38)的表达变化。分析松果菊苷作用后细胞中蛋白的表达变化特点。结果:体内实验结果显示,与正常组相比,模型组大鼠精子存活率、活力降低、畸形率增加(p<0.05),睾丸组织中SOD活力降低(p<0.05)、LDH含量减少(p<0.05),GSH含量减少(p<0.01)。WB检测睾丸组织中MAPK信号通路的关键蛋白JNK和p-38蛋白的的表达中,与正常组相比,模型组p-JNK和p-p-38蛋白的表达量明显增加(p<0.01)。与模型组比较,阳性对照组(VC组)大鼠精子存活率和活力增加(p<0.05)、畸形率降低(p<0.01),睾丸组织中SOD活力、LDH含量、GSH含量均有所增加,但无显著差异(p>0.05)。WB检测JNK和p-38蛋白的磷酸化表达量明显减少(p<0.05)。与模型组比较,松果菊苷低、中剂量组大鼠精子存活率和活力增加(p<0.05)、睾丸组织中SOD活力和LDH含量均有所增加,但无显著差异(p>0.05)。松果菊苷低剂量组WB检测p-38蛋白的磷酸化表达量减少,但无显著差异(p>0.05),JNK蛋白的磷酸化表达量明显减少(p<0.05)。松果菊苷中剂量组畸形率降低(p<0.01),GSH含量明显增加(p<0.01)。WB检测p-p-38蛋白的表达量减少(p<0.05),p-JNK蛋白的表达量明显减少(p<0.01)。松果菊苷高剂量组精子存活率增加(p<0.01)、活力增加(p<0.01)、畸形率降低(p<0.01),睾丸组织中LDH含量增加,但无显著差异(p＞0.05),SOD活力增加(p<0.01),GSH含量增加(p<0.05)。WB检测JNK和p-38蛋白的磷酸化表达量明显减少(p<0.01)。大鼠睾丸组织HE染色结果显示,松果菊苷可以改善改善生精障碍大鼠睾丸结构。体外实验结果显示,MTT确定最佳刺激条件为100μmol/L松果菊苷作用于细胞。试剂盒检测给予松果菊苷治疗后的TM3细胞中抗氧化能力明显增加。WB检测细胞内JNK和p-38蛋白的磷酸化表达量与动物体内实验检测结果基本一致,细胞损伤逐渐恢复。结论:松果菊苷可改善生精功能障碍大鼠精子质量;松果菊苷可减轻醋酸铅致生精功能障碍大鼠睾丸和过氧化氢致氧化应激损伤TM3细胞氧化应激损伤水平;松果菊苷可改善醋酸铅致生精功能障碍大鼠睾丸形态结构;松果菊苷可影响睾丸组织和TM3细胞p38和JNK蛋白的表达,可能通过调控MAPK信号通路发挥抗生精功能障碍作用。