【摘 要】
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[目的]通过双向调节CaMK Ⅱ水平,探讨大鼠肝移植术后CaM/CaMK Ⅱ对肝细胞线粒体损伤、凋亡的影响。[方法]将健康雄性SD大鼠随机分为5组(A、B、C、D、E组),每组10对,行kamada
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[目的]通过双向调节CaMK Ⅱ水平,探讨大鼠肝移植术后CaM/CaMK Ⅱ对肝细胞线粒体损伤、凋亡的影响。[方法]将健康雄性SD大鼠随机分为5组(A、B、C、D、E组),每组10对,行kamada二套管法建立SD-SD大鼠原位肝移植,在供体肝脏取下后分别从从门静脉输注表达CaMK ⅡγshRNA(A组)、CaMK Ⅱγ(B组)的慢病毒载体及CaMK ⅡγshRNA慢病毒空白载体(C组)、CaMK Ⅱγ的慢病毒空白载体(D组)转染供肝,对照组(E组)输注生理盐水,术后各1d、3d、7d、14d分别用Western bolt检测CaM、CaMK Ⅱ、cytochrome C、ALF水平,QRT-PCR检测CaM、CaMK ⅡγmRNA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。[结果]1、成功建立kamada“二袖套法”大鼠原位肝移植模型。2、A组各时点肝CaM、CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF、水平低,差异有统计学意义(P<0.01)。B组各时点肝CaM、CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF、水平高,差异有统计学意义(P<0.05)。QRT-PCR检测：A组各时点CaM mRNA水平低、CaMK ⅡmRNA水平低,差异有统计学意义(P<0.05)。B组各时点CaM mRNA水平低、CaMK ⅡmRNA水平高,差异有统计学意义(P<0.05)。C、D、E组差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡水平：A组最低,B组最高,C、D、E组无显著差异。[结论]大鼠肝移植术后,对CaM/CaMK Ⅱ信号通路中CaMK Ⅱ的下调、可以有效减少肝细胞Cyt C、AIF蛋白的水平,降低肝脏线粒体损伤、细胞凋亡的程度。
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