骨碎补总黄酮的富集、分析工艺及其颗粒剂质量标准研究

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阿尔茨海默症是记忆、认知能力逐渐退化的神经性疾病,目前未有有效的治疗手段,已成为全世界攻克的难题。传统中医认为,诸多原因可致阿尔茨海默症,多为肾气虚衰,致使髓海不足,故补肾填髓是治疗之根本。现代药理学表明,骨碎补中黄酮类化合物是改善记忆功能的主要活性成分,故本实验筛选优化了骨碎补总黄酮的富集工艺,并建立了骨碎补总黄酮颗粒剂的制备工艺。  在提取工艺中,考虑到药厂投产的可行性,最终确定醇水混合剂作为总黄酮的提取剂。采用L9(34)正交法做综合分析,进而选择骨碎补总黄酮的最适提取工艺:选择55%乙醇水作为提取溶剂,生药量:提取剂=1∶14,加热回流提取3次,每次1.5h。  在富集工艺中,以骨碎补中的柚皮苷、新北美圣草苷、总黄酮的含量为评价指标,筛选出最佳富集工艺:优化L9(34)正交法对醇洗脱流速、醇洗脱用量、上样体积流量等因素进行考察。以单因素和正交实验法,优化出骨碎补总黄酮的最佳富集工艺:称定AB-8型大孔树脂129,上样溶液为20.8mg/mL的总黄酮溶液,上样体积10mL,静态吸附12h后,分别用5BV的水和50%6BV的乙醇以2.0BV/h流速进行洗脱,收集洗脱液,减压干燥后得总黄酮富集物。富集物中骨碎补总黄酮的含量为85.33%,柚皮苷含量为19.14%,新北美圣草苷含量为10.81%。  在制剂工艺中,以颗粒剂成型得率作为评价指标,设计L9(34)正交实验,筛选出颗粒剂制备工艺中的物料辅料比、润湿剂浓度、辅料配比,制定出最佳制剂工艺。最终确定工艺流程∶总黄酮液减压干燥(恒温50℃,压力0.08MPa)至重量不再变化,粉碎,以干膏粉:辅料=1∶6,辅料乳糖:糊精=2∶3,混合均匀,加入少量95%乙醇揉搓成软材,过16目筛制粒,45℃烘干,过筛去粉。  建立了骨碎补总黄酮颗粒剂的质量标准:本品为棕褐色颗粒、大小均一、味微甜;采用薄层色谱法对颗粒剂进行了定性鉴别,均在与对照品色谱相应的位置上,显现相同颜色的斑点。本法操作简便、专属性强;粒度、水分、溶化性、干燥失重检查均符合药典相关规定;利用高效液相色谱法对颗粒进行了含量测定,结果显示颗粒剂中的柚皮苷平均含量为2.814%,新北美圣草苷的平均含量为1.57%,各项指标的中的RSD均小于3%,说明本法精密度高、重复性好。  本实验建立了骨碎补总黄酮、柚皮苷、新北美圣草苷定量分析方法,通过方法学考察证明其准确性、重复性及稳定性良好,可用于骨碎补中总黄酮的含量测定;优化了骨碎补中总黄酮有效部位的最佳提取、富集工艺、制剂工艺,方法简单可行。富集物中总黄酮类成含量较高、总黄酮转移率较好。实验证实骨碎补总黄酮具有治疗阿尔茨海默症的功效,骨碎补总黄酮颗粒剂对治疗阿尔茨海默病具有极大的潜在药用价值。
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