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东莨菪碱是一种莨菪烷型生物碱,相较于阿托品等莨菪烷类生物碱类似物,其药用价值更高,因而需要一种从茛菪烷类生物碱混合物提取东茛菪碱的分离方法。采用的分子印迹技术(MIT)虽然可以特异性分离结构相似的物质,但常规功能单体与莨菪烷类生物碱进行小分子组装时,作用位点几乎相同。鉴于常规功能单体合成的分子印迹聚合物(MIPs)无法有效地从茛菪烷类生物碱混合物中有效分离出东莨菪碱,本研究创新性制备出具有双重识别东茛菪碱位点的新型印迹聚合物,并应用于分析富集东莨菪碱。本文开展的具体研究内容及结果汇总如下:1.合成一种新型的功能单体富马酸单乙酯(MFMA),以东莨菪碱为模板分子,运用沉淀聚合法,在超临界二氧化碳(scCO2)中与交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)共聚制备了富马酸单乙酯基分子印迹聚合物(MFMA-MIP)。使用红外光谱、扫描电镜、比表面积仪和核磁共振谱仪表征了聚合物和功能单体的结构。对比了溶胀法和索氏提取法移除模板分子的效率,验证了使用超临界流体技术的优势。使用核磁共振氢谱研究了 MFMA与模板分子的组装机理,验证了功能单体两个官能团与模板分子均有作用。评估了 MFMA-MIP的吸附性能,对东莨菪碱的最大吸附量为49.75 mg/g。制备了以丙烯酸和丙烯酸乙酯为功能单体的印迹聚合物(AA-co-EAA-MIP),作为对照组评估了 MFMA-MIP的选择性能,选择因子为3.5,东莨菪碱对莨菪碱和山莨菪碱的选择因子(β)为1.8和2.1,高于AA-co-EAA-MIP的1.25和1.67,验证了 MFMA-MIP能更有效地区分莨菪烷类生物碱。2.使用对香豆酸(p-CD)作为主体功能单体,4-乙烯基苯胺(4-AM)作为辅助功能单体,EGDMA作为交联剂,在氧化石墨烯(GO)表面进行分子印迹,合成了氧化石墨烯表面分子印迹聚合物(p-CA-MIP@GO)。利用红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)、热失重(TG)对MIP进行表征,验证了 p-CA-MIP@GO化学结构、表面形貌和物理性能。通过等温吸附实验和吸附动力学实验证明了GO表面载体材料有利于提高MIP吸附效果,以及p-CA-MIP@GO表面有特异性识别空穴。吸附实验中p-CA-MIP@GO的最大仏值为77.1 mg/g,是NIP的仏值的5.17倍。p-CA-MIP@GO对东莨菪碱选择性吸附因子为4.7,东茛菪碱对莨菪碱和山莨菪碱的1β为2.04和2.47,证明p-CA-MIP@GO能应用于实际样本中分离茛菪烷类生物碱。3.以p-CA-MIP@GO作为填充基质,搭建了固相萃取柱(SPE)与高效液相色谱(HPLC)联用系统。在优化洗脱液流速、配比和洗脱时间后,p-CA-MIP@GO-SPE-HPLC系统成功应用于分析多元混合基质,对东莨菪碱的回收率为93.0%-102.0%,远高于对茛菪碱和山莨菪碱的回收率之和(22.0%-29.0%)。在加标的洋金花和颠茄粗提物品中,东莨菪碱的回收率范围时95.0-103.0%,并且最高RSD低于7.1%。p-CA-MIP@GO-SPE柱在重复多次使用后,对于东茛菪碱的回收率几乎不变,证明p-CA-MIP@GO-SPE-HPLC系统能成功应用于生物样品的分析富集。