【摘 要】
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目的:本研究制备了超顺磁性壳聚糖载胰岛素样生长因子结合蛋白5（IGFBP5）纳米粒（SPCIONPs/pIGFBP5）,以研究其作为基因载体的有效性及其生物安全性,用磁场辅助作用下的磁转染系统对骨肉瘤的肺转移进行靶向治疗。方法:用透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪、超导量子干涉仪和原子力显微镜对SPCIONPs进行表征;使用CCK8、体内心肝脾肺肾HE染色、血液生化指标检测其体内外生物安全性;使
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目的:本研究制备了超顺磁性壳聚糖载胰岛素样生长因子结合蛋白5（IGFBP5）纳米粒（SPCIONPs/pIGFBP5）,以研究其作为基因载体的有效性及其生物安全性,用磁场辅助作用下的磁转染系统对骨肉瘤的肺转移进行靶向治疗。方法:用透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪、超导量子干涉仪和原子力显微镜对SPCIONPs进行表征;使用CCK8、体内心肝脾肺肾HE染色、血液生化指标检测其体内外生物安全性;使用激光共聚焦显微镜检测体外转染效果;克隆集落形成检测SPCIONPs/IGFBP5对细胞增殖的影响,细胞划痕实验检测SPCIONPs/IGFBP5对细胞迁移的作用,transwell实验来检测SPCIONPs/pIGFBP5对细胞侵袭的作用;体内实验组织普鲁士蓝,及肺组织的HE染色检测雾化吸入SPCIONPs/pIGFBP5并在外加磁场辅助下靶向于骨肉瘤的肺转移。结果:FTIR与AFM结果示羧基化的超顺磁性氧化铁与壳聚糖以酰胺键的形式接枝成功,制备的SPCIONPs平均粒径约为22 nm,Zeta电位为11.3 m V,凝胶电泳结果示SPCIONPs能与质粒紧密结合并保护其免受DNA酶降解;CCK8、体内心肝脾肺肾HE染色、血常规、CRP和肝肾功结果均显示体内外不会引起明显的炎症反应,与对照组相比差异均无统计学意义;体外转染结果显示SPCIONPs/pIGFBP5组比壳聚糖负载IGFBP5（CS/pIGFBP5）组有更多的红色荧光表达。体外恶性生物学结果示SPCIONPs/pIGFBP5能明显抑制细胞增殖,细胞迁移和侵袭。在体外磁场辅助下,组织切片的普鲁士蓝染色示,在肺内有大量的蓝色颗粒沉积,体内肺组织的HE染色示SPCIONPs/pIGFBP5组肺转移灶的个数少于对照组。结论:本研究所制备的SPCIONPs具有良好的生物安全性,可以有效地将pIGFBP5转移到143B细胞中抑制骨肉瘤的恶性生物学行为,在外加磁场辅助作用下在体内可以靶向治疗骨肉瘤肺转移。
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