四种不同树龄沉香药材的质量评价

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目的:本研究对广东省汕头市四种树龄即五年、八年、十二年、十五年的沉香药材样品进行化学及镇痛药效研究,综合以上两方面的比较研究探讨不同树龄对沉香药材质量的影响,从而对不同树龄的沉香药材进行质量评价,进一步为沉香药材建立系统的质量评价体系和产业化研究提供思路。方法:1.采用2010版《中国药典》中沉香项下性状鉴别、薄层色谱、醇溶性浸出物的含量及其微量升华实验法,以及紫外鉴定法对沉香样品进行品质鉴定。2.根据2010版《中国药典》(一部)附录项下的方法进行一般质量研究。3.利用各种鉴定试剂对沉香药材各提取部位的成分进行系统研究。4.进行正交实验优选沉香挥发性成分的提取工艺,并对挥发性成分进行GC-MS分析。5.利用热板、醋酸致小鼠疼痛扭体反应实验考察不同树龄沉香药材挥发性成分的镇痛药效情况,并探讨沉香药材镇痛作用与挥发性成分之间的关系。结果:1.品质鉴定研究结果表明:四种树龄沉香药材的性状、薄层及微量升华实验结果都符合药典规定;随着树龄的增长沉香药材醇提物的含量增多、颜色加深、紫外吸收值逐渐增大。2.一般质量研究结果表明:四种树龄沉香药材灰分及浸出物含量均随树龄的增长而增加,并且在各树龄之间差异较大,尤其是醇溶性浸出物(热浸法)和醚溶性浸出物(冷浸法)的含量差异极大。3.化学成分系统预实验结果表明:本实验样品含有有机酸、挥发油、酚类、鞣质、还原糖及糖、多糖及其苷、甾体皂苷、甾醇、香豆素及其苷、内酯、强心苷;可能含有生物碱、氨基酸、多肽、三萜皂苷、蛋白质;不含黄酮和蒽醌类成分。4.超声提取工艺正交实验结果表明:最佳提取工艺为30ml三氯甲烷常温浸泡6h,超声提取20min。GC/MS分析结果表明:从样品中共检测出44个化学成分,5年、8年、12年、15年生沉香药材样品各分离得到89、88、62、65个峰,分别检出28、20、29、31个化合物。各样品分离出的化学成分稍有不同,但都以倍半萜、芳香族类成分为主,且都含有沉香特征性成分苄基丙酮、β-愈创木烯、圆柚酮等。随着树龄的增长倍半萜类化合物含量呈先减少后增多又有所减少的趋势,相反芳香族化合物呈先增多而后减少的趋势。5.小鼠热板致痛实验结果表明:各实验组均可延长小鼠热板痛阈值,镇痛药效均优于空白对照组。8年、12年生药材组起效快于5年、15年生药材组且在90min后药效均显著优于5年、15年生药材组(P<0.05,P<0.01),8年生药材组在各时间点的痛阈值都大于12年生药材组,但差异不显著(P>0.05),四种树龄药材中8年生药材组的镇痛药效最佳。而5年和15年生药材组的痛阈值交叉变化,镇痛药效差别不显著(P>0.05)。小鼠醋酸扭体实验结果表明:在给药后30min内各实验组均可显著减少小鼠扭体次数(P<0.01),镇痛药效均优于空白对照组。8年、12年生药材组的扭体次数显著少于5年、15年生药材组(P<0.01),8年生药材组扭体次数少于12年生药材组,四种树龄药材中8年生药材组的镇痛药效最佳。15年生药材组的扭体次数少于5年生药材组的,但不显著(P>0.05)。结论:1.四种树龄沉香药材均为正品沉香药材;沉香药材的醇提物含量、颜色,紫外吸收值均与树龄呈正相关。2.四种树龄沉香药材的一般质量与树龄呈正相关,并且在各树龄之间差异较大。3.化学成分系统预实验虽然不能对药材所含有的化学成分进行准确定性,但是对后期研究具有指导意义。4.经GC/MS分析研究,各类成分相对总量的变化趋势各不相同,并且与树龄不呈正相关。提示在沉香质量标准中可增加以上相关项目的检测,以便更好地控制其质量。5.沉香药材镇痛药效与树龄并不呈正相关。8年、12年生药材的镇痛药效显著优于5年、15年生的,8年生沉香药材的镇痛药效最佳。联系GC/MS分析结果,8年生药材所含的芳香族化合物相对百分含量最多,提示沉香药材中芳香族化合物中可能含有其镇痛作用的基础物质,具体物质还有待进一步研究。
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