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目的体外探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合真菌葡聚糖(curdlan)能否活化支气管上皮细胞内 NLRP3 炎性小体(Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NOD样受体-3),芍药苷(Peanoflorin)对该NLRP3炎性小体的活化是否有抑制作用及其相关机制。方法LPS联合真菌葡聚糖建立感染模型分组:①空白对照组:不加任何处理因素;②LPS组:加入μg/ml的LPS培养12小时;③curdlan组:加入终浓度分别为10 μg/ml、lOOμg/ml、1mg/ml 的 curdlan 共培养 12 小时;④LPS+curdlan 组:加入终浓度为5μg/ml的LPS培养3小时进行预刺激,移去LPS,加入终浓度为 10 μg/ml、100 μg/ml、1 mg/ml 的 curdlan 共培养 12 小时;⑤NAC+LPS+curdlan组:NAC溶于PBS,终浓度分别取1mmol/L、5mmol/L,预作用1h,LPS作用3小时，1mg/ml curdlan共培养12小时⑥PF+LPS+curdlan组:芍药苷溶于RMPI1640,最终共培养浓度分别为10μM、30μM、10OμM,预作用1小时,LPS作用3小时，1mg/ml curdlan共培养12小时。RT-PCR检测细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1 β mRNA 的表达;ELISA 检测细胞上清中(interleukin,IL)-lβ含量;caspase-1活性检测试剂盒检测胞内caspase-1活化程度;流式检测胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)变化;Western Blotting 检测胞内 NLRP3、caspase-1、IL-1 3蛋白表达变化。结果1)LPS联合真菌葡聚糖促进16HBE细胞内NLRP3、caspase-1、IL-1[3 mRNA表达显著增加,细胞上清中IL-1β分泌显著增多,胞内NLRP3、caspase-1、IL-iβ蛋白的表达也较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2)LPS联合真菌葡聚糖通过胞内ROS增加,活化支气管上皮细胞内NLRP3炎性小体,当给予ROS抑制剂NAC预作用后,胞内ROS产生明显减少,同时NLRP3与IL-1β的合成和表达、caspase-1合成与活化均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。3)芍药苷通过减少16HBE细胞内ROS产生抑制LPS联合真菌葡聚糖所诱导NLRP3炎性小体的活化,随着芍药苷浓度的大,胞内ROS的量减少的愈多,与NLRP3、caspase-1、IL-iβ的变化趋势一致,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LPS联合真菌葡聚糖可有效活化支气管上皮细胞内NLRP3炎性小体,而芍药苷能有效抑制胞内ROS产生从而抑制炎性小体活化、抑制真菌葡聚糖所致的炎性反应。