CTV介导下褐色橘蚜的取食选择和种群适合度研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pigho
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
由褐色橘蚜Toxoptera citricida(Kirkaldy)高效传播的柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV),可侵染柑橘属以及柑橘近缘属的植物。CTV发生范围遍及全球多个热带、亚热带地区,被视为柑橘植物的重大威胁。病原体可以通过对媒介昆虫的影响来加强其对新宿主植物的传播,并且前期研究发现CTV感染甜橙显著改变褐色橘蚜的适合度和选择行为,这种相互作用对CTV的获取和传播有积极影响。在实际生产过程中,田间存在不同的柑橘品种,尚不清楚CTV的感染对蚜虫的行为的影响是否因柑橘品种的不同而存在差异。本论文围绕“CTV介导下褐色橘蚜的取食选择和种群适合度研究”这一科学问题,以CTV易感、抗性柑橘品种和褐色橘蚜为研究对象,明确CTV对褐色橘蚜寄主选择和适合度的影响,进一步利用色谱、酶活性测定、转录组等技术揭示植物应对CTV感染的内在生理和分子响应机理。研究结果可为新形势下病毒流行的科学防控和媒介昆虫的有效治理提供理论依据。主要研究结果如下:1.褐色橘蚜在不同柑橘品种上的适合度比较通过刺吸电位图谱和种群增长实验,评估8种不同柑橘品种(香橙Citrus junos Sieb.ex Tanaka、粗柠檬C.jambhiri Lush.、罗浮金柑Fortunella margarita Swingle、奥林达夏橙C.sinensis(L.)Osbeck、岩溪晚芦碰柑C.reticulata Blanco、路德红夏橙C.sinensis、尤力克柠檬C.limon(L.)Osbeck和枳Poncirus trifoliata(L.)Raf)的抗蚜性。结果表明,褐色橘蚜取食EPG参数在8种不同柑橘品种上差异较大,其中褐色橘蚜在尤力克上花了更多的时间在路径波阶段,而在韧皮部阶段的时间较少;在香橙、枳和粗柠檬上观察到的情况正好相反。蚜虫种群增长实验表明,在尤力克和枳上,蚜虫的种群增长显著低于其他品种。研究结果表明不同的柑橘品种明显地影响了柑橘蚜虫的取食能力。与其他7种柑橘品种相比,褐色橘蚜不偏好在尤力克柠檬上取食,尤力克对褐色橘蚜表现出明显的抗性,而香橙和粗柠檬是易感的寄主植物。该研究结果明确了CTV易感植株香橙和CTV耐受植株枳的抗蚜性水平。2.CTV感染柑橘对褐色橘蚜生长发育的影响研究比较了褐色橘蚜在CTV感染和未感染的两种不同抗性柑橘品种上的发育历期、繁殖力及取食行为。结果表明,褐色橘蚜在健康或CTV香橙上,每个龄期的发育历期和成虫前期均小于褐色橘蚜在枳植物上。在被CTV感染的香橙植株上1龄若虫发育历期为1.83±0.03 d,显著短于健康香橙植株(1.89±0.03 d),该参数在枳品种上也呈现类似结果。褐色橘蚜成虫前期在CTV感染的香橙植株上的发育比健康香橙植株快。与健康香橙品种相比,褐色橘蚜在感染CTV香橙植株上的成虫前期存活率差异不显著,但枳品种表现差异显著。褐色橘蚜在CTV感染香橙植株上的成虫寿命、产蚜历期和繁殖力均显著高于健康香橙植株。褐色橘蚜在感染CTV香橙植株上的内禀增长率r、周限增长率λ和净繁殖率R0均显著高于健康香橙植株上的参数值。感染CTV的香橙植株的平均世代时间T(10.88±0.008 d)短于健康香橙植株(10.94±0.009 d),但差异不显著。由此可见,CTV的感染不同抗性寄主对褐色橘蚜的生长发育影响不同,媒介昆虫的生长发育受到寄主抗性的影响,这些影响可能在CTV流行中发挥关键作用。3.CTV感染对柑橘叶片中生化指标影响CTV感染不同柑橘寄主均可显著性影响嫩梢组织中氨基酸组成。CTV感染香橙植株中总糖含量显著低于健康柑橘植株总糖含量。不同柑橘品种在CTV感染后其细胞液的p H值差异显著,均表现为CTV感染后的柑橘的p H值显著小于未感染的柑橘植株。CTV感染后对两种柑橘寄主叶绿素的相对含量无显著影响,但显著影响叶绿素荧光动力学参数。4.CTV感染和褐色橘蚜取食对不同柑橘品种挥发性有机化合物谱的影响通过室内生物测定,与未感染CTV植株相比,CTV感染的植株吸引更多的褐色橘蚜。使用动态顶空系统收集感染CTV的香橙/枳、无毒蚜取食的感染CTV的香橙/枳、未感染CTV的的香橙/枳挥发物,利用气相色谱质谱法GC-MS技术鉴定分析健康或CTV感染的柑橘植物所排放的挥发性有机化合物(VOCs)。GC-MS结果显示,不同柑橘品种组分差异较大,香橙中的挥发物组成和含量相对高于枳,其中萜烯类挥发物的相对含量最高。通过主成分分析,2个品种8个处理的主要挥发性有机化合物表现出明显分离。感染CTV病毒和褐色橘蚜取食均显著影响两种柑橘植株挥发性有机化合物种类和组分的变化。在香橙中,CTV接种后,γ-Terpinene和(-)-β-Elemene显著下降,而β-Pinene相对含量显著增加;蚜虫取食后,β-Pinene、2-Ethyl-1-hexanol和Longifolene的释放量显著增加;CTV接种和蚜虫取食共同作用后,D-Limonene、p-Cymene、β-Ocimene和γ-Terpinene等成分相对含量均显著减少。枳品种接种CTV病毒和蚜虫取食处理后以及两者共同作用后,Camphene、β-Phellandrene、Sabinene、β-Ocimene、γ-Elemene、(-)-β-Elemene、Caryophyllene、cis-β-Farnesene、Humulene和β-Sesquiphellandrene等成分相对含量均显著低于未处理枳样品;然后,蚜虫取食枳后,样品中3-Carene的相对含量均显著高于未处理枳和CTV感染枳样品。5.CTV感染和蚜虫取食引起的防御反应差异测定了不同抗病柑橘品种在感染CTV和褐色橘蚜为害后柑橘重要防御酶活性及植物内源茉莉酸、水杨酸含量变化。结果表明,褐色橘蚜取食和CTV病毒感染可诱导不同抗性柑橘植株内超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、过氧化物酶POD、脂氧合酶LOX、苯丙氨酸解氨酶PAL以及β-1,3-葡聚糖酶的活性和内源JA、SA的显著变化,但在不同抗性柑橘品种之间有差异;褐色橘蚜危害后抗性品种枳较香橙体内CAT和POD活性较香橙高,抗性强;CTV感染的香橙植物有明显较高的SA水平,且蚜虫取食诱导更多的JA;蚜虫取食引起内源SA和JA含量增加显著高于CTV感染引起的变化。推测寄主体内防御物质的改变可能是感病植株影响褐色橘蚜生物学特性的重要因素之一。6.CTV感染对不同抗性柑橘品种的转录组分析采用高通量测序平台对在感染和未感染CTV的两个柑橘品种(香橙和枳)的叶片进行转录组测序,用Trinity软件对高质量的clean reads进行拼接和de novo组装,通过Blast软件将组装的unigene在九大数据进行比对注释,结果表明:共获得81,732条unigenes,其中N50长度为2,694 bp;用NR数据库对所有基因进行了同源性分析,表明这两个品种与克莱门柚Citrus clementina、甜橙C.sinensis以及蜜柚C.unshiu的同源性最高;香橙品种共鉴定出1284个差异表达基因,其中有545个基因上调和739个基因下调,而枳品种仅有205个差异表达基因,其中186个基因上调和19个基因下调;KEGG富集分析结果显示在香橙中,CTV感染处理和健康对照下,差异基因富集最明显的途径主要是植物-病原物互作,植物激素信号转导和MAPK信号通路-植物;在枳中,差异基因主要参与了植物-病原物互作,泛素介导的蛋白质水解,植物激素信号转导;q RT-PCR和RNA-seq获得的表达谱相互一致,从而验证了RNA-seq产生的结果的可靠性。研究结果为深入研究不同柑橘品种的防御机制奠定理论基础。
其他文献
上世纪90年代启动的人类基因组计划,正式开启了全球生物大数据时代。人类基因组计划的完成诞生了基因组信息学以应对其产生的海量数据,而代谢网络与基因组信息学密切关联,已成为研究与应用的热点。这涉及到酶反应之间的相关性计算,代谢途径的计算算法,13C标记动力学的模拟计算和13C代谢通量的计算。代谢网络是一种完整的决定细胞生理学与生物化学属性的整套代谢和物质过程,代谢网络执行生物生存,发育和繁殖所需的物质
学位
冷胁迫是不利的环境因素之一,可以导致植物的各种代谢产物发生变化,影响其正常生长发育,从而限制了作物的生产与产量。甘氨酸甜菜碱(Glycinebetaine,GB),又被简称为甜菜碱,广泛分布于植物体内,是一种高效无毒的小分子渗透调节物质,可以调节细胞内的渗透压,在植物逆境响应中发挥着重要的作用。众所周知,植物在寒冷、干旱或盐等胁迫下可以引起甜菜碱在细胞内的积累,然而,这一生理反应的具体作用机制及涉
学位
番茄(Solanum lycopersicum)是一种重要的蔬菜作物,为全球消费者提供丰富的营养物质。果实色泽作为番茄果实一种重要的感观品质,影响果实的商品性。条斑是自然界中是一种常见的色泽表型,如在玉米、苹果、西瓜和花卉中普遍发生,但是造成这种色彩差异分布的机理研究较少。目前研究者对色泽差异分布的机理主要归因于功能基因突变、RNA沉默、转座子跳跃和基因启动子甲基化。在番茄常规育种中,条斑番茄gs
学位
双目视觉作为三维重建的关键技术之一,因其硬件设备简单、对场景变化鲁棒性强等特点,广泛应用于自动驾驶、机器人定位和工业智能制造等领域。匹配算法是双目视觉的核心技术和研究重点,目的是提取高精度的视差图,进而准确获取三维场景的深度信息。然而,随着硬件设备的快速升级,当前的双目视觉匹配算法对高分辨率图像中弱纹理、无纹理、重复纹理、光照变化、遮挡和深度边缘等病态区域易产生误匹配、全局算法计算复杂度高、跨域的
学位
半翅目害虫是我国稻区生态系统中种类最多、数量最大、危害最重的害虫类群,其中稻飞虱每年危害面积占水稻虫害总面积的1/3以上,是我国水稻生产最主要的害虫。长期以来对稻区害虫防治主要以化学农药为主,而过度依赖化学农药带来的“3R”问题已日趋严重,因此,环境友好、生态安全的可持续害虫防控策略已成为当前粮食安全的迫切需求。寄生蜂作为稻区生态系统中最常见的害虫天敌,是抑制害虫种群的重要因子。目前关于我国稻区寄
学位
矿产资源是人类生存发展物质基础。迄今我国科学家已经发现173个矿种,形成了大量的地质资料与科研成果。本文在全国潜力评价工作的基础上,总结形成了矿床成矿系列综合信息预测理论方法体系,该体系以矿床成矿系列、成矿分析、综合信息矿产预测理论为基础,以区域综合信息编图、综合信息预测模型构建及矿产资源定量预测为主要内容,通过构建地质空间数据库、圈定矿预测类型和工作区、编制专题预测底图-综合信息预测要素图、建立
期刊
光调控器件在高速光通信、光显示、激光雷达和激光遥感等领域中有着重要的应用。由于传统光调控器件受到经典衍射极限的约束,其尺寸远大于电学器件的尺寸,导致光调控器件价格贵且体积大。在集成光调控技术发展的早期,薄膜材料虽然起到至关重要的作用,但在实际应用中仍然受加工条件、晶格匹配以及固定带隙的限制。自从成功制备石墨烯以来,不断涌现的超薄二维材料具有传统薄膜材料所不具备的电学、光学、力学特性以及与现有的CM
学位
手性农药是农业、工业中广泛用于病害治理的化学产品。在手性环境中,通常手性农药的一个对映体对目标生物体具有活性,而其他对映体则不具有活性。而且手性农药的对映体通常以不同的速率代谢,非活性对映体会被排放到环境中,对非目标生物体造成毒性。因此,手性农药的高效立体选择性合成是当前开发新型高效、低毒的绿色农药的重要手段。小分子催化剂氮杂环卡宾作为一种新型、温和的催化剂,具有多样的活化模式和丰富的反应形式,因
学位
转录因子(TFs)参与植物对多种内源信号和环境信号的激活和抑制,在植物的许多发育过程和防御反应中起着重要的调控作用。转录因子可分为不同的类型:基础转录因子和特异转录因子。ALOG结构域蛋白被证明是一个存在于陆地植物中的特异性TFs家族,参与调控植物的许多生长和发育过程。矮牵牛(Petunia hybrida),属于茄科碧冬茄属,花色繁多,花色艳丽,栽培管理简单,享有“花坛之王”的美誉。同时,矮牵牛
学位
有机膦在生命体中是不可缺少的一类有机化合物,许多天然膦酸酯类化合物(如α-氨基膦酸酯、α-羟基膦酸酯等)在研究过程中被发现具有抗植物病毒、抗肿瘤、抗血栓、抗细菌、抗氧化等生物活性,手性膦酸酯类药物的开发使用可提高药物经济性,还可有效减小对环境危害。含膦功能性分子的不对称合成仍具有一定的挑战性因而备受广泛关注。氮杂环卡宾(N-Heterocyclic Carbene,简称NHC)是一类重要的小分子催
学位