论文部分内容阅读
目的:γ-分泌酶在胃癌侵袭转移中的作用目前鲜有报道。本研究通过应用特异性的γ-分泌酶抑制剂(LY411575,LY900009)及sh RNA构建等技术干扰γ-分泌酶的活性,进而通过体外和体内实验研究γ-分泌酶对胃癌细胞生物学行为的影响,有助于阐明γ-分泌酶在胃癌发生发展中的作用,为发现胃癌早期诊断的特异性肿瘤标志物和新的治疗靶标提供线索。方法:1.测定LY411575及LY900009对胃癌细胞MGC-803和HGC-27的半数有效浓度,体外应用其有效降低γ-分泌酶的活性。应用细胞增殖实验、平板克隆实验、软琼脂克隆实验、侵袭实验,划痕实验及裸鼠转移瘤模型评估γ-分泌酶抑制剂对胃癌细胞生物学行为的影响。2.通过慢病毒构建,稳定沉默γ-分泌酶的活性基团(presenilin-1,PS-1)抑制γ-分泌酶活性,并通过裸鼠皮下成瘤模型从动物水平评估γ-分泌酶对胃癌细胞增殖能力中的影响。结果:1.γ-分泌酶抑制剂(LY411575,LY900009)对胃癌细胞MGC-803及HGC-27的半数有效浓度分别是0.093±0.005和0.924±0.008mg/L。2.与阴性对照组相比,γ-分泌酶抑制剂能有效降低胃癌细胞的增殖速率,差异具有统计学意义(P<0.01)。3.γ-分泌酶抑制剂能显著抑制胃癌细胞平板克隆能力和软琼脂克隆能力,差异具有统计学意义(P<0.01)。4.γ-分泌酶抑制剂能够显著抑制胃癌细胞的侵袭能力和侧向迁移能力(P<0.01)。5.与阴性对照组相比,干扰γ-分泌酶活性能够显著抑制裸鼠皮下移植瘤的大小,差异具有统计学意义(P<0.01)。6.抑制γ-分泌酶活性能降低胃癌细胞在裸鼠体内肺脏及肝脏转移率(P<0.05)。结论:1.LY411575和LY900009能够显著抑制γ-分泌酶的活性。2.γ-分泌酶抑制剂能够削弱胃癌细胞MGC-803和HGC-27的增殖、侵袭迁移能力。3.抑制γ-分泌酶的核心基团的活性能降低胃癌细胞在裸鼠体内的转移和增殖。