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植物病害给全球经济造成巨大损失，目前解决该问题的办法主要是使用化学杀菌剂，培育抗病新品种等，但化学杀菌剂污染环境，给人畜的健康造成威胁；抗病新品种在培育过程中，经济成本高，培育周期长；由于该些问题的存在，植物病害现象未能得到有效的控制。植物病害多是由病原真菌所引起，利用拮抗菌的生防机制来控制植物病害既高效又环保，具有广阔的空间。本文旨在以12株病原菌为指示菌，自本实验室保存的300余株芽孢杆菌中进行广谱拮抗芽孢杆菌的筛选，测定其所产抗菌物质的抑菌谱。结合形态学观察、生理生化鉴定以及16S rDNA同源性分析，对筛选获得的拮抗芽孢杆菌进行鉴定，测定其理化性质稳定性，优化该拮抗芽孢杆菌产抗菌物质的发酵条件，并对其所产抗菌物质进行初步分离纯化。本实验的主要实验方法和实验结果如下：1、以9株病原真菌与3株病原细菌为病原指示菌，采用平板打孔法与牛津杯法，自实验室保存的300余株芽孢杆菌中进行拮抗菌株的筛选，并对其所产抗菌物质的抑菌谱进行测定。最终获得一株广谱拮抗芽孢杆菌NCPSJ7。2、结合形态观察与革兰氏染色观察，生理生化鉴定，16S rDNA鉴定等手段，对拮抗芽孢杆菌NCPSJ7进行鉴定。结果显示，NCPSJ7的个体形态，菌落特征，生理生化特征均与解淀粉芽孢杆菌相似。通过提取NCPSJ7的基因组DNA，PCR扩增，将16S rDNA序列在NCBI网站中进行同源性分析比较，其与编号NC016784.1等前几株解淀粉芽孢杆菌的同源性高达99%。因此将NCPSJ7鉴定为解淀粉芽孢杆菌。3、为了更好地了解拮抗解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7所产抗菌物质的理化性质，本实验以西瓜枯萎病菌与桃根霉腐烂病菌为病原指示菌，以抑菌圈直径的大小为抑菌性能的衡量指标，对NCPSJ7抗菌物质粗提液的热稳定性、蛋白酶稳定性、pH稳定性以及有机溶剂的稳定性分别进行检测。结果显示，NCPSJ7在4℃、40℃、60℃、80℃、100℃、121℃下处理30min，其抑菌性能稳定。经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K于37℃处理90min，其抑菌性能几乎不变。经pH8、9、10处理3h后，其抑菌性能趋于稳定。经乙腈于37℃处理4h后，其抑菌性能在稳定的基础上甚至有所提高。综上所述，NCPSJ7所产抗菌物质具有稳定的理化性质。4、为了提高抗菌物质产量，本实验对拮抗解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7产抗菌物质的发酵条件进行优化。以西瓜枯萎病菌与桃根霉腐烂病菌为病原指示菌，以抑菌圈直径的大小为抑菌性能的衡量指标。优化后的发酵条件为：发酵时间：6天，装液量：100mL/250mL，接种量：3.00%，转速：150r/min，发酵温度为34℃。5、本实验通过葡聚糖Sephadex G-100凝胶对经硫酸铵沉淀的NCPSJ7进行初步分离纯化，并以西瓜枯萎病菌与桃根霉腐烂病菌为病原指示菌，以抑菌圈直径的大小为抑菌性能的衡量指标，对初步分离纯化所得峰进行抑菌性能检测。利用SDS-PAGE对初步分离纯化所得峰进行蛋白质相对分子质量测定。结果显示，经葡聚糖Sephadex G-100凝胶初步分离纯化所得的峰Ⅱ具有抑菌性能，且经SDS-PAGE检测显现出一条谱带，其相对分子质量约为24kDa。本文筛选获得一株广谱拮抗解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7，其理化性质稳定，对其产抗菌物质的发酵条件进行优化，并对其所产抗菌物质进行初步分离纯化。该实验为生物防治提供科学依据，为工业生产奠定良好基础。