论文部分内容阅读
自身免疫调节因子(Autoimmune regulator,Aire)对于维持中枢免疫耐受至关重要。一方面,Aire参与胸腺T细胞阴性选择,另一方面,Aire诱导胸腺中的自身反应性T细胞分化发育为调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)。Aire在外周免疫系统中,主要表达在树突状细胞(Dendritic Cells,DCs)和淋巴结基质细胞等细胞中,其作用机制尚不清楚。DCs作为固有免疫和适应性免疫的重要“桥梁”,在免疫稳态和免疫应答中均发挥重要作用,是重要的免疫调节剂。DCs可在胸腺中发育,也可从外周迁移到胸腺,发挥致耐受作用。DCs通过直接表达自身抗原或从外周收集和提呈抗原,进而表达多种TRAs的机制参与免疫耐受,DCs也能有效诱导Tregs的产生,维持免疫耐受。因此,我们设想,能否将Aire的中枢免疫耐受机制与DCs的免疫耐受作用相结合,为自身免疫病如1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,T1D)提供更有效的治疗策略。因此,我们首先将Aire转导至骨髓来源的DCs中,观察其在体外的致耐受作用;随后,在NOD鼠体内观察其对T1D的缓解治疗效果,为包括T1D在内的自身免疫病寻求更好、更有效的治疗方法。一、过表达Aire的BMDCs体外致耐受作用首先我们成功获得Aire过表达的BMDCs细胞(Aire-BMDCs),体外检测Aire-BMDCs的致耐受作用。结果显示,在LPS、CD40L和Poly(I:C)等条件刺激下,Aire-BMDCs中共刺激分子和MHC-Ⅱ分子均低于对照组(GFP-BMDCs);Aire-BMDCs中几种T1D相关TRAs的表达高于GFP-BMDCs;Aire-BMDCs诱导胰岛素自身反应性T细胞的增殖和凋亡;Aire-BMDCs促进na?ve CD4+T细胞发育分化为Tregs和Th2细胞,抑制其向Th1、Th17和Tfh细胞的分化。结果表明,Aire能够通过维持BMDCs的未成熟状态、诱导BMDCs相关TRAs的表达、促进自身反应性T细胞的凋亡和影响na?ve CD4+T的分化发育等发挥致耐受作用。二、移植过表达Aire的BMDCs对NOD鼠T1D的治疗作用为进一步明确Aire-BMDCs是否能够治疗T1D,我们将Aire-BMDCs转移到已发病的NOD鼠体内,探讨其治疗作用。结果显示,与NS组、GFP-BMDCs组和Aire/Ins-si RNA-BMDCs组相比,Aire-BMDCs能够明显减轻NOD鼠的病情,影响NOD鼠T细胞亚群变化,诱导其自身反应性T细胞的凋亡。结果证明,在体内,Aire-BMDCs影响T细胞亚群的变化及自身反应性T细胞的凋亡,发挥免疫耐受作用,从而缓解NOD鼠T1D病情。本研究表明,过表达Aire的BMDCs具有诱导免疫耐受的特性,可作为一种有效的T1D治疗手段,为自身免疫病的治疗提供新策略。