论文部分内容阅读
背景和目的：血管内皮生长因子VEGF，又称血管通透因子VPF，是目前已知的活性最强和特异性最高的促血管生成因子，它们特异性的作用于血管内皮细胞，促进内皮细胞迁移、增殖，参与了新生血管和淋巴管的形成。VEGF参与了肿瘤血管的新生，促进肿瘤增殖和转移，还参与了免疫系统的调节，帮助肿瘤细胞逃脱机体免疫系统的监视。目前研究表明，鼻咽癌的发病与VEGF基因多个位点的多态性有一定的关联。本研究以广西地区本地常住居民为研究对象，探讨血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)基因启动子区-460T/C位点单核苷酸多态性（SNP）与广西人群鼻咽癌发生发展的易感性关联。方法：采用病例对照研究，研究对象分为两组，其中鼻咽癌病例组240例，健康对照组245例，记录两组人群的一般资料。正常健康组抽取清晨禁食外周静脉血5ml，病例组于治疗前抽取清晨空腹外周静脉血5ml，血液标本经枸橼酸钠抗凝后立即置于-20℃条件下保存。提取两组人群外周血白细胞DNA，采用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因片段，直接测序法检测两组人群VEGF-460T/C位点单核苷酸的多态性；ELISA法测定人外周血EB-VCA-IgA抗体的效价。将测得的对照组基因多态性频率进行Hardy-Weinberg平衡定律分析，P＞0.05说明对照组人群基因具有代表性。所有数据由SPSS19.0软件分析，P＜0.05认为有统计学意义。采用卡方检验对病例组及对照组的一般资料进行统计分析。用多因素非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、民族、吸烟情况、EB-VCA-IgA抗体及鼻咽癌家族史等状况校正的相对风险度的比值比（odds ratio，OR）及其95%可信区间（confidence interval，CI）。结果：1.正常对照组中VEGF-460T/C基因型T/T、T/C、C/C在对照组中的频率分别为63.3%，32.2%，4.5%，经分析，基因多态性分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P＞0.05）。2.鼻咽癌病例组及对照组人群中，具有鼻咽癌家族史的人数分别为：33（13.8%）、19（7.8%），EBV-VCA-IgA的阳性率分别为：87.1%、15.1%，统计分析显示，鼻咽癌家族史及EBV-VCA-IgA阳性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P＜0.05）；说明鼻咽癌家族史及EBV-VCA-IgA阳性是鼻咽癌的风险因素。3.VEGF-460位点T/T、T/C+C/C基因型在病例组中的频率分别为52.9%、47.1%，在对照组中的频率分别为：63.3%、36.7%，差异有统计学意义（χ2=5.335，P=0.021）。鼻咽癌组中VEGF-460T/C SNP C等位基因频率（27.5%）明显高于对照组（20.6%），差异有统计学意义（χ2=6.303，P=0.012）。与T等位基因相比，携带有C等位基因的基因型可显著增加鼻咽癌的发病风险(OR=1.458，95%CI：1.115-1.952)；进一步分析VEGF-460基因型与鼻咽癌病例组临床资料的关系发现，NO-1期组C等位基因的频率显著低于N2-3组（P＜0．05，OR=2.214，95%CI：1.276-3.842），提示C等位基因可增加NPC淋巴结转移的风险。结论： EB病毒衣壳抗原IgA抗体（EB-VCA-IgA）和鼻咽癌家族史是鼻咽癌的风险因素。VEGF基因启动子区-460T/C单核苷酸多态性与鼻咽癌易感性存在显著相关性。VEGF-460C等位基因可增加鼻咽癌的发病风险，并且可以增加鼻咽癌淋巴结转移的风险，但具体的分子生物学作用机制还需要进一步研究。