研究背景食管癌是常见的一种恶性肿瘤,我国是食管癌高发区,并且发病率和病死率居世界首位。常见的病理类型有食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和食管腺癌(esophageal adenocarcinoma,EAC),在我国以前者多见,约占90%以上,后者较少见,占10%左右。食管鳞状细胞上皮重度不典型增生作为食管鳞癌癌前病变,是食管正常组织到恶变的一个重要过渡阶段。食管癌的发生是多种因素参与、多阶段、多步骤发展的复杂过程,其发生及发展主要与癌基因过度表达及抑癌基因失活有关。现代肿瘤学认为基因的改变主要涉及两方面:遗传学的改变和表观遗传学的异常;近年多种研究发现表观遗传学的异常改变在肿瘤的发生发展中起到非常重要的作用。表观遗传学是研究基因表达的学科,它是指基因表达的改变不依赖DNA序列的变化,其异常可导致基因的表达沉默和缺失,而其中以DNA甲基化为研究最多的表观遗传调控形式之一[1];MAL基因位于人染色体2q13,它最早由Alonso等[2]于1987发现的一个在T细胞分化中晚期时表达的基因,该基因编码一种高度疏水蛋白,最初推断它与T淋巴细胞分化成熟有关,后续研究证实MAL基因是远端质膜和高尔基体之间囊泡转运和蛋白质分选的作用成分之一。MAL在机体不同种类的细胞中均有表达,对于细胞的正常结构和功能有不可或缺的作用。多项试验研究证实MAL基因是一种候选的抑癌基因,并在很多肿瘤细胞中的表达减少或缺失,其启动子高度甲基化可能是基因失活和表达缺失的主要机制之一。不同的研究证实MAL基因甲基化存在于多种肿瘤中,但在食管黏膜上皮不典型增生中的研究少见,因此本文研究食管不典型增生过程中的MAL甲基化状态,及探讨MAL甲基化在食管癌变发生发展中是否为一连续事件或有某种关联性趋势,以期对食管癌的早期诊断和筛查会提供一定的参考价值。目的1.研究MAL基因在食管鳞状上皮细胞不典型增生、食管鳞状细胞癌的甲基化状态及临床意义。2.MAL基因甲基化程度与食管癌变是否有关联。方法随机收集郑州大学第一附属医院2014.10-2015.10年间食管鳞癌患者术后组织病理标本共36例,其中包括癌组织及癌旁正常组织,其术前均未接受化疗和放疗等治疗;另随机收集郑州大学第一附属医院病理科食管粘膜上皮不典型增生组织标本共47例,其中轻度不典型增生13例,中度不典型增生21例,重度不典型增生13例;试验方法主要使用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测食管鳞癌、不典型增生及其对应旁正常组织中MAL甲基化水平。统计学方法采用χ2检验和Fisher确切概率法,以p<0.05为有统计学意义,由SPSS 20.0软件完成。结果1.食管鳞癌组织中MAL甲基化发生率为22例(61.1%),癌旁正常组织中MAL基因甲基化率为11.1%,两组之间的甲基化发生率比较有统计学意义(p<0.05)。2.食管上皮不典型增生共47例,MAL基因甲基化19例,(39.5%);其中轻度不典型增生13例,发生甲基化2例(15.4%),病变旁正常组织0例(0%)(p>0.05),轻度不典型增生与对应病变旁组织比较无差异;中度不典型增生21例,其中发生甲基化10例(47.6%),病变旁组织2例发生甲基化(9.5%),(p<0.05),两组比较有统计学意义;重度不典型增生共13例,其中发生甲基化7例(53.0%),病变旁正常组织1例发生甲基化(7.6%),(p<0.05),两组相比较有统计学意义。3.ESCC组织中MAL的甲基化水平与年龄、性别、侵袭深度、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期等食管癌相关临床病理因素无显著相关性(p>0.05)。结论1.MAL基因甲基化改变发生于食管的轻、中和重度不典型增生组织,随病变程度的增加,基因的甲基化频率呈逐渐升高趋势。2.食管鳞癌中DNA甲基化可能为MAL基因失活的机制之一,MAL甲基化检测可能为今后食管癌早期辅助诊断提供一种新的筛查检测方法。3.食管鳞癌中MAL基因甲基化频率与相关病理因素,如年龄、性别、侵润深度、肿瘤大小、淋巴结有无转移、肿瘤分期无相关性。