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目的：
和厚朴酚（Honokiol，HK）具有抗脑卒中、抗炎、抗血小板聚集等重要生理活性。但其水溶性差和体内较低口服生物利用度，使其发展为药物受到极大限制。近年来主要通过制剂学研究来提高HK水溶性，以期达到增加其口服吸收、提高生物利用度目的，但制剂在生产和使用中也存在一定限制。因此，本研究采用了一种可以极大程度提高和厚朴酚水溶性的药物设计方法：即将和厚朴酚改造为和厚朴酚磷酸酯前药即和厚朴酚双磷酸酯四钠（HKP）。主要研究目的：合成和表征HKP，以增强HK的亲水性；对HKP的溶液稳定性、体外的磷酸酶条件下水解性能以及在大鼠体内药代动力学进行研究；验证HKP是否可减轻局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积并保护其免受神经损伤的生理活性。
方法：
利用三氯氧磷与和厚朴酚中酚羟基反应合成前药HKP；配制HKP、HK过饱和水溶液，利用高效液相色谱法（HPLC）测定两者的水中表观溶解度；将HKP溶解于不同pH的PBS缓冲液中，利用HPLC法检测HKP和HK从而测定HKP稳定性；利用HPLC法检测磷酸酯酶缓冲液和人体外血浆中HKP水解、释放HK含量；SD大鼠体内分别通过静脉注射和灌胃给予HKP和HK，采用高效液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）检测不同时间点血浆中HK浓度，并用软件WinNonlin7.0非房室模型计算各组的药代动力学参数。
将79只SD雄性大鼠分为模型对照组、HKP低剂量（100μg/kg）组、HKP高剂量（5mg/kg）组、阳性药物组（丁苯酞，10mg/kg）。线栓法对大鼠进行局部脑缺血灶灌注损伤模型造模，静脉连续给药三天。对大鼠神经功能行为评分（NSS）和脑梗死范围进行评价，并计算脑梗死抑制率。
结果：
1.合成得到HKP，反应路线简单易操作，反应完全。HKP和HK的溶解度分别为126.98mg/mL、0.0223mg/mL，说明HKP能明显改善HK的溶解度。
2.HKP溶液在37℃、不同pH条件下，3天内是稳定的，HKP不会自发水解为母药HK。但pH为2.2、孵育时间为96h时检测到了HK，因此HKP尽量避免放在酸性环境中保存或使用。
3.在体外碱性磷酸酯酶作用下，HKP能立即水解出HK，水解半衰期（T1/2）为8.90±2.11s；HKP在体外人血浆中孵育8h后可检测到HK的存在，证明HKP能在体外人血浆中释放出HK。
4.HKP前药的药代参数明显优于其母药HK。从药代结果可知：HKP-静脉给药组的Tmax与母药HK相同，为0.08h；在0.08h检测到HKP-静脉给药组大鼠的血浆浓度（Cmax）是HK-静脉给药组的2.7倍，分别为32554.80±3331.71ng/mL和12256.90±1761.85ng/mL；与静脉注射HK后相比，静脉注射HKP后半衰期显著延长，t1/2分别为0.66±0.01h和7.97±1.30h；HKP-IV组的药时曲线下面积AUC（0-∞）为14289.34±967.70h·ng·mL-1，是HK-IV组的2倍左右。此外，HKP也能改善口服给药的药代参数，HKP-PO组的药时曲线下面积AUC（0-∞）为379.09±119.08h·ng·mL-1，也大于HK-PO组的287.59±99.01h·ng·mL-1；HKP-PO组的达峰时间为0.25h，明显早于HK-PO组的1h，证明HKP的吸收明显优于其母药HK。
5.实验结果证明：与模型组相比，HKP和丁苯酞都能改善缺血再灌注大鼠模型的神经行为学评分，且HKP组效果都优于阳性药物，给药3天后，模型对照组、HKP低剂量（100μg/kg）组、HKP高剂量（5mg/kg）组、阳性药物组（丁苯酞，10mg/kg）大鼠的NSS分别为10.93±1.49、7.47±3.08、8.31±2.98和9.41±2.65；HKP能减少大鼠脑梗死体积，且效果优于阳性对照药物丁苯酞，各组脑梗死范围分别为23.62±4.19、21.79±5.86、22.97±5.69和27.09±3.21。
结论：
1.三氯氧磷与和厚朴酚中酚羟基反应合成所得产物HKP能明显提高其母药HK的溶解性能，为易溶化合物，且HKP水溶液的稳定性能良好。
2.HKP能在碱性磷酸酯酶缓冲液和体外人血浆中水解释放出其母药HK。
3.HKP在大鼠体内能快速释放出其母药HK，无论是口服还是静脉给药，HKP的药代参数都明显优于其母药HK。
4.HKP能改善缺血再灌注大鼠模型的神经功能，减少大鼠脑梗死体积，且效果都优于阳性对照药物丁苯酞。
和厚朴酚（Honokiol，HK）具有抗脑卒中、抗炎、抗血小板聚集等重要生理活性。但其水溶性差和体内较低口服生物利用度，使其发展为药物受到极大限制。近年来主要通过制剂学研究来提高HK水溶性，以期达到增加其口服吸收、提高生物利用度目的，但制剂在生产和使用中也存在一定限制。因此，本研究采用了一种可以极大程度提高和厚朴酚水溶性的药物设计方法：即将和厚朴酚改造为和厚朴酚磷酸酯前药即和厚朴酚双磷酸酯四钠（HKP）。主要研究目的：合成和表征HKP，以增强HK的亲水性；对HKP的溶液稳定性、体外的磷酸酶条件下水解性能以及在大鼠体内药代动力学进行研究；验证HKP是否可减轻局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积并保护其免受神经损伤的生理活性。
方法：
利用三氯氧磷与和厚朴酚中酚羟基反应合成前药HKP；配制HKP、HK过饱和水溶液，利用高效液相色谱法（HPLC）测定两者的水中表观溶解度；将HKP溶解于不同pH的PBS缓冲液中，利用HPLC法检测HKP和HK从而测定HKP稳定性；利用HPLC法检测磷酸酯酶缓冲液和人体外血浆中HKP水解、释放HK含量；SD大鼠体内分别通过静脉注射和灌胃给予HKP和HK，采用高效液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）检测不同时间点血浆中HK浓度，并用软件WinNonlin7.0非房室模型计算各组的药代动力学参数。
将79只SD雄性大鼠分为模型对照组、HKP低剂量（100μg/kg）组、HKP高剂量（5mg/kg）组、阳性药物组（丁苯酞，10mg/kg）。线栓法对大鼠进行局部脑缺血灶灌注损伤模型造模，静脉连续给药三天。对大鼠神经功能行为评分（NSS）和脑梗死范围进行评价，并计算脑梗死抑制率。
结果：
1.合成得到HKP，反应路线简单易操作，反应完全。HKP和HK的溶解度分别为126.98mg/mL、0.0223mg/mL，说明HKP能明显改善HK的溶解度。
2.HKP溶液在37℃、不同pH条件下，3天内是稳定的，HKP不会自发水解为母药HK。但pH为2.2、孵育时间为96h时检测到了HK，因此HKP尽量避免放在酸性环境中保存或使用。
3.在体外碱性磷酸酯酶作用下，HKP能立即水解出HK，水解半衰期（T1/2）为8.90±2.11s；HKP在体外人血浆中孵育8h后可检测到HK的存在，证明HKP能在体外人血浆中释放出HK。
4.HKP前药的药代参数明显优于其母药HK。从药代结果可知：HKP-静脉给药组的Tmax与母药HK相同，为0.08h；在0.08h检测到HKP-静脉给药组大鼠的血浆浓度（Cmax）是HK-静脉给药组的2.7倍，分别为32554.80±3331.71ng/mL和12256.90±1761.85ng/mL；与静脉注射HK后相比，静脉注射HKP后半衰期显著延长，t1/2分别为0.66±0.01h和7.97±1.30h；HKP-IV组的药时曲线下面积AUC（0-∞）为14289.34±967.70h·ng·mL-1，是HK-IV组的2倍左右。此外，HKP也能改善口服给药的药代参数，HKP-PO组的药时曲线下面积AUC（0-∞）为379.09±119.08h·ng·mL-1，也大于HK-PO组的287.59±99.01h·ng·mL-1；HKP-PO组的达峰时间为0.25h，明显早于HK-PO组的1h，证明HKP的吸收明显优于其母药HK。
5.实验结果证明：与模型组相比，HKP和丁苯酞都能改善缺血再灌注大鼠模型的神经行为学评分，且HKP组效果都优于阳性药物，给药3天后，模型对照组、HKP低剂量（100μg/kg）组、HKP高剂量（5mg/kg）组、阳性药物组（丁苯酞，10mg/kg）大鼠的NSS分别为10.93±1.49、7.47±3.08、8.31±2.98和9.41±2.65；HKP能减少大鼠脑梗死体积，且效果优于阳性对照药物丁苯酞，各组脑梗死范围分别为23.62±4.19、21.79±5.86、22.97±5.69和27.09±3.21。
结论：
1.三氯氧磷与和厚朴酚中酚羟基反应合成所得产物HKP能明显提高其母药HK的溶解性能，为易溶化合物，且HKP水溶液的稳定性能良好。
2.HKP能在碱性磷酸酯酶缓冲液和体外人血浆中水解释放出其母药HK。
3.HKP在大鼠体内能快速释放出其母药HK，无论是口服还是静脉给药，HKP的药代参数都明显优于其母药HK。
4.HKP能改善缺血再灌注大鼠模型的神经功能，减少大鼠脑梗死体积，且效果都优于阳性对照药物丁苯酞。