黑色素瘤基因(MAGE-1)相关肽负载树突状细胞对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

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第一部分 树突状细胞(DC)的体外培养及鉴定 目的:研究肝癌患者外周血树突状细胞体外培养的可行性。 方法:建立人DC体外培养体系并进行DC形态、得率、纯度、表型、分泌功能方面的测定。 结果:成功地建立了DC体外培养体系,所得DC具有典型树突状细胞的特征。得率为12.8±0.13%,纯度为87.5±1.2%,上清液中IL-12含量为1.0±0.2ng/ml。 结论:HCC患者外周血中可培养出数量及功能均理想的DC;可作为一种新型的肿瘤疫苗。 第二部分 黑色素瘤基因(MAGE-1)相关肽负载DC诱导淋巴细胞对HCC细胞的体外杀伤作用 目的:应用MAGE-1抗原肽负载的DC在体外诱导出高度特异性的抗肝癌免疫应答。 方法:分离HCC患者外周血单个核细胞;GM-CSF、IL-4、TNF-α联合培养获得DC;应用MAGE-1多肽负载DC并激活自体T淋巴细胞,使之增殖、分化为细胞毒T细胞(CTL);MTT法检测CTL对BEL-7402HCC细胞的体外杀伤作用。
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