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目的本研究旨在检测TF(tissue factor)和CD62p (P-selectin)在肺癌患者血清中的浓度,分析其意义及二者有无相关性,初步探讨二者作为肺癌肿瘤标志物的可行性,指导肺癌早期诊断、分期分型及预后,为其作为靶分子治疗肺癌提供一定的依据。方法1.收集本院肿瘤内科及胸外科60例初治肺癌住院病人的血液标本,同时收集肺部良性病变病人血液标本30例及健康体检者血液标本25例。将他们分别分为3组即肺癌组、肺部良性疾病组和健康对照组。肺癌组(60例),非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer NSCLC)中:鳞癌14例,腺癌16例,其他13例;Ⅰ、Ⅱ期19例,Ⅲ、Ⅳ期24例。小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer SCLC)17例。低分化35例,中分化10例,高分化15例。肺部良性病变组(30例),其中结核瘤9例,纤维瘤5例,炎性假瘤11例,平滑肌瘤5例。2.每个人收集2份标本,所有人均于清晨空腹,用大号针头注射器肘前静脉采血10ml,将中间一段血液分别注入已加好枸橼酸钠抗凝剂两只硅化处理过的样本管中分别为2m1和2.7ml,2ml管盖好盖子后立即轻轻地颠倒混匀数次,即送检测CD62p。2.7ml管3000r/min,离心10分钟,分离血浆,取上清液转致EP管,标记好后于-20℃冰箱低温保存。3.采用酶联免疫吸附法(enzymelinked immunnosorbent ELISA)检测TF在血清中的浓度,浓度结果用ng/1表示。采用流式细胞术(flow cytometry FCM)检测血清中CD62p的含量。4.统计学处理:计量资料用x±s表示,两独立样本间的比较采用t检验的统计学分析方法;三组和多组间比较采用单因素方差分析;正态分布的变量之间的相关性分析采用Pearson相关分析的方法,数据用SPSS13.0统计软件进行处理,P<0.05有统计学意义。结果所有数据都经过正态性检验,服从正态分布。1.ELISA实验结果:血浆TF的比较(1)肺癌患者、肺部良性病变患者及健康人血清TF的比较:健康对照组、肺部良性疾病组与肺癌组血清TF浓度(χ±s,ng/l)分别为58.60±3.52、75.15±1.28、198.77±45.49。经方差分析得出三组均数不全相同(p<0.001);做LSD两两比较,健康对照组与肺部良性疾病组比较,两者差异无统计学意义(P>0.05);肺癌组与其它两组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。(2)非小细胞肺癌患者与小细胞肺癌患者血清TF的比较:非小细胞肺癌组与小细胞肺癌组血清TF浓度(χ±s, ng/l)分别为186.94±44.01、241.97±44.56,两者差异有统计学意义(P<0.01)。(3)非小细胞肺癌中,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期患者血清TF的比较:Ⅱ、Ⅱ期肺癌组与Ⅲ、Ⅳ期肺癌组血清TF浓度(χ±s, ng/l)分别为144.05±44.61、200.16±33.08,两者差异有统计学意义(P<0.001)。(4)腺癌组与鳞癌组患者血清TF的比较:腺癌组与鳞癌组血清TF浓度(x±s,ng/l)分别为193.48±42.48、151.09±35.59,两者差异有统计学意义(P<0.01)。(5)低、中、高分化组患者血清TF的比较:低、中、高分化肺癌组血清TF浓度(χ±s,ng/l)分别为193.38±18.33、158.75±26.07、114.50±11.28,经方差分析得出三组均数不全相同(p<0.001);做LSD两两比较,低分化组与高分化组比较,两者差异有统计学意义(P<0.001):中分化组与其它两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2.FCM实验结果:血浆CD62p的比较(1)肺癌患者、肺部良性病变患者及健康人血清CD62p的比较:健康对照组、肺部良性疾病组与肺癌组血清CD62p阳性率(x±s,%)分别为0.93±0.40、1.18±0.17、2.31±1.11,经方差分析得出三组均数不全相同(p<0.001):做LSD两两比较,健康对照组与肺部良性疾病组比较,两者差异无统计学意义(P>0.05);肺癌组与其它两组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。(2)非小细胞肺癌患者与小细胞肺癌患者血清CD62p的比较:非小细胞肺癌组与小细胞肺癌组血清CD62p阳性率(x±s,%)分别为2.28±1.09、1.85±1.13,两者差异无统计学意义(P>0.05)。(3)非小细胞肺癌中,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期患者血清CD62p的比较:Ⅰ、Ⅱ期肺癌组与Ⅲ、Ⅳ期肺癌组血清CD62p阳性率(x±s,%)分别为1.70±0.55、3.03±0.72,两者差异有统计学意义(P<0.001)。(4)腺癌组与鳞癌组患者血清CD62p的比较:腺癌组与鳞癌组血清CD62p阳性率(x±s,%)分别为2.44±0.94、1.74±0.66,两者差异有统计学意义(P<0.05)。(5)低、中、高分化组患者血清CD62p的比较:低、中、高分化肺癌组血清CD62p阳性率(x±s,%)分别为2.10±1.62、2.08±0.76、1.57±0.57,无显著差异(P>0.05),无统计学意义。3.TF与CD62p相关性(1)肺癌血清TF和CD62p之间存在相关性,呈正相关(Pearson相关系r=0.424,p=0.000)(2)在腺癌中,TF和CD62p之间存在相关性,呈正相关,(Pearson相关系数r=0.521,p=0.038)(3)在鳞癌中,TF和CD62p之间存在相关性,呈正相关,(Pearson相关系数r=0.606,p=0.022)结论1.肺癌患者血清中有较高水平的TF、CD62p表达,明显高于健康对照者及肺部良性疾病患者的水平,提示TF、CD62p可作为肺癌血清肿瘤标志物之一,对肺癌的诊断有一定的帮助。2.小细胞肺癌血清中TF的含量明显高于非小细胞肺癌,推断与小细胞肺癌恶性程度高,倍增时间短(33天),易转移有关;腺癌血清中TF及CD62p的含量显著高于鳞癌,推断与腺癌易出现早期转移有关,提示TF及CD62p在肺癌病理分型上有一定指导作用。3.肺癌细胞分化程度越低,血清中TF的含量越高,即肺癌恶性程度越高,血清TF含量越高。4.不同的分期肺癌患者血清中TF及CD62p的水平亦存在明显的差别,晚期患者血清中TF及CD62p高于早期,提示TF及CD62p可指导肺癌分期,TF、CD62p共同参与了肺癌的侵袭转移过程,可联合作为判断预后的指标。5.肺癌患者血清TF和CD62p水平之间存在正相关性,共同促进肺癌的发生发展。