CRISPR/Cas9介导的黑腹果蝇lncRNA及RNA结合蛋白的筛选和功能鉴定

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真核生物基因组中有大量转录区域可产生非编码RNA,其中的一类长链非编码RNA(lncRNA)具有大部分mRNA的特征却不编码蛋白,而是以RNA的形式调控各种生命活动,因此备受科学界关注。除此以外,很多非编码RNA都以核糖核蛋白形式发挥其功能,可见RNA结合蛋白的功能研究是发现更多RNA调控功能的一个重要途径。然而,目前大部分lncRNA及RNA结合蛋白的功能尚未清楚。本研究以黑腹果蝇为研究对象,利用CRISPR/Cas9介导的基因敲除筛选获得18个lncRNA突变体及17个RNA结合蛋白突变体。研究发现长链非编码RNA CR43653可以促进胰岛素受体的转录水平的表达。此外,低营养条件下,CR43653的缺失体应激能力提高;高胰岛素条件下,CR43653的缺失体化蛹、羽化时间延后。另一方面,我们发现RNA结合蛋白CG5589非移码突变体中唾液腺的细胞核核仁变大,且有明显空洞,此现象在移码突变体中尤为明显。同时,我们还发现CG5589在染色体有丝分裂中起重要作用。这些结果一方面为果蝇基因组水平的RNA调控理论增加了数据,同时还为疾病预防提供了更多的理论基础。
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