最新研究表明,USP39在肝细胞癌（HCC）的发生发展中起着重要作用。然而,USP39促进HCC发生发展的分子机制尚不明确,特别是它的泛素化功能。Zinc finger E-box binding homeobox 1（ZEB1）是 上 皮-间 质 转 化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）促进肿瘤增殖和转移的关键诱导因子,但是ZEB1的稳定性调节机制在HCC中仍不清楚。首先,本研究将从USP39是否去泛素化调控ZEB1的稳定性,介导EMT,影响肝癌的进展进行探讨。我们通过免疫组化法分析肝癌患者临床组织样本发现USP39在人类HCC组织中表现为高表达,并与不良预后相关。USP39下调能够通过调控ZEB1和EMT相关蛋白表达,介导EMT表型变化,抑制HCC细胞的增殖和迁移。同时,我们发现USP39下调对ZEB1 mRNA没有显著影响,且蛋白合成抑制剂cycloheximide（CHX）和泛素蛋白酶体抑制剂Z-Leu-Leu-Leu-al（MG132）处理肝癌细胞证明USP39通过翻译后修饰调控ZEB1的表达。细胞体内泛素化实验表明下调USP39使ZEB1的泛素化程度增加,而过表达USP39则降低ZEB1的泛素化水平。GST pull-down体外纯化USP39蛋白能够降低ZEB1的泛素化水平。此外,分析USP39的不同结构域对ZEB1泛素化水平的作用,发现USP结构域是USP39发挥去泛素化功能的活性催化残基。有趣的是,对USP39敲低细胞的转录组学和生物信息学分析,结合免疫共沉淀法和免疫荧光染色法发现去泛素酶USP39与E3连接酶TRIM26存在相互结合作用。故我们将进一步分析USP39靶向调控ZEB1与TRIM26是否存在某种联系。通过分析肝癌患者组织芯片的免疫组化染色结果发现TRIM26在人肝癌组织中表现为较低表达,且抑制肝癌细胞增殖和迁移。此外,实验结果提示,TRIM26通过翻译后修饰调控ZEB1蛋白表达。细胞体内泛素化实验表明,下调TRIM26降低ZEB1的泛素化水平,而过表达TRIM26则增加ZEB1的泛素化程度。GST pull-down体外纯化TRIM26蛋白能够提高ZEB1的泛素化水平,故说明TRIM26通过泛素化调控ZEB1蛋白的降解。再者,我们发现USP39-TRIM26通过泛素化作用调控ZEB1的蛋白表达,且去泛素酶USP39和E3连接酶TRIM26通过拮抗作用,但不是竞争关系,控制ZEB1稳定性进而决定HCC进展。即USP39能够逆转TRIM26调控ZEB1的变化趋势,而TRIM26也能够逆转USP39调控ZEB1的变化趋势,在调控HCC的增殖和迁移中发挥着对应的功能。体外裸鼠实验,进一步证实了 USP39-TRIM26调控ZEB1的表达,两者通过拮抗模式,影响肝癌的进展。总之,我们的研究揭露了一种新的机制,即USP39和TRIM26能够平衡ZEB1泛素化水平,进而决定肝癌细胞的增殖和迁移。这一新的机制可能为抑制HCC发展的靶向治疗提供新的方法,通过对具有高ZEB1蛋白水平的HCC患者进行恢复TRIM26或抑制USP39的表达来实现。