【摘 要】
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染色质重构与基因表达的渐成性调控已成为基因表达调控的研究热点之一.该文以处于雌雄蕊形成期的水稻幼穗为材料构建了cDNA文库.根据已知的具SET结构域基因CLF、E(z)和MEA的
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染色质重构与基因表达的渐成性调控已成为基因表达调控的研究热点之一.该文以处于雌雄蕊形成期的水稻幼穗为材料构建了cDNA文库.根据已知的具SET结构域基因CLF、E(z)和MEA的保守序列设计简并引物,经PCR得到一个SET结构域片段.以之标记探针筛选cDNA文库并进行cDNA末端快速扩增,分离到一个全长为2,957bp的cDNA,命名为OsSET1.该基因推测的开放读码框编码895氨基酸残基的蛋白,分子量为99.8kDa.核酸印记杂交和生物信息学分析表明OsSET1基因以单拷贝形式存在于水稻基因组中.OsSET1基因定位于第三号染色体,包含7,306bp,具有17个外显子.分离的OsSET1基因上游序列具有高活性启动子的特征.不同时期水稻的不同器官的反转录PCR和蛋白免疫印记实验表明OsSET1基因在水稻中组成性表达.基因枪介导的瞬时表达实验揭示OsSET1蛋白是细胞核定位的.反义抑制和RNA干涉抑制OsSET1基因的表达,不能得到成活的转基因苗.而拟南芥中过量表达SET结构域导致SAM特征基因WUS和CUC1的表达异常并影响了茎端分生组织的原体原套结构的正常发育,可能的作用机制正在进一步分析中.
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