H9N2亚型禽流感是目前我国流行范围最广泛，危害最大的低致病性禽流感，自从1994年在我国首次分离以来，其流行范围已涉及我国大部分的省市、地区。本实验对1998年以来在我国大陆地区流行的47株H9N2亚型禽流感病毒进行了分离。我们对这些毒株进行了流行和演化规律的研究以及免疫原性的研究，从分子流行病学角度和血清学角度对我国流行的H9N2亚型禽流感病毒的防制提供参考和依据。　　 试验一、47株H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白基因流行演化规律的研究　　 本试验对1998-2008年覆盖我国东北、华北、华东、华南、西南及华中等地区的47株H9N2亚型禽流感分离株进行了HA蛋白全基因序列扩增及测序。研究发现:在中国大陆流行的H9N2亚型禽流感既有欧亚分支的毒株也有美洲分支的毒株，而且我国大陆地区流行的欧亚分支毒株只集中在A/Duck/HongKong/Y280/97(H9N2)亚分支中。中国大陆地区欧亚分支株的分离株亲源关系在86.8％-99.9％之间，美洲分支毒株与欧亚分支株的亲缘性在80.7％-89.1％之间。这些分离株的裂解位点氨基酸序列均符合低致病性禽流感的氨基酸序列特征。有部分毒株在218-220aa处缺少潜在的糖基化位点，HA蛋白的受体结合位点的氨基酸序列除198位变异比较大外，其余位置均比较保守。我国部分地区流行H9N2禽流感呈现一定的规律性。　　 试验二、H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白氨基酸差异与病毒抗原性差异的比较研究　　 本试验从全国各地分离到的47株H9N2亚型禽流感病毒中挑选出有代表性的12株，对这些毒株的HA基因进行了序列测定，并推倒出其HA蛋白氨基酸序列。用分子生物学软件比较这些HA蛋白的氨基酸序列的差异。用SPF鸡制备出这些毒株的免疫血清，通过交叉HI试验，计算出不同毒株间的抗原相关系数。通过对HA蛋白氨基酸序列的分析及抗原相关性的分析，我们发现这些毒株在抗原位点处，在第183位和188位氨基酸有所差异。通过对HA蛋白氨基酸序列差异性和抗原性差异的分析我们发现，二者呈正相关。HA蛋白氨基酸序列差异达到一定程度却可以造成抗原性的改变，当HA蛋白氨基酸序列差异大于7％时，抗原性的改变比较明显，而当HA蛋白氨基酸序列差异小于3.6％时，抗原性无明显差异。　　 试验三、H9N2亚型禽流感引起的鸡群生理指标变化分析　　 通过测定H9亚型禽流感发病鸡群及健康鸡群的某些生理指标，发现H9亚型禽流感疾病状态下皮质醇激素、FT3甲状腺激素和血清钙的水平均呈明显变化，而生长激素、FT4甲状腺激素和血清磷无明显差异。这些变化是由于机体对疾病的抵抗或代谢紊乱产生的，可以作为疾病诊断的依据。