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目的:药用辅料是保证药物制剂生产和发展的物质基础,在制剂剂型和生产中起着关键的作用。药用辅料常被视为惰性物质,目前对辅料的关注主要集中在辅料的质量和理化特性,而对辅料的生物学效应未引起足够的关注。然而越来越多的证据表明药用辅料间接或直接影响药物在体内的代谢过程、疗效及安全性。聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(polysorbate80,PS80)是一种在液体、半固体以及固体制剂中均有广泛应用的药用辅料。细胞色素P450酶是在药物代谢环节起关键作用的I相代谢酶。目前,已有相关文献报道了PS80有潜在的效应,但是PS80对药物代谢酶、m RNA表达的影响尚不不清楚。本研究旨在从酶活性水平和m RNA表达水平考察PS80对大鼠Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp2c11、Cyp2c7、Cyp2d2和Cyp3a1酶的影响,以期为临床用药提供指导意见。方法:首先,建立同时测定大鼠血浆中7种主要代谢酶(Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp2c11、Cyp2c7、Cyp2d2和Cyp3a1)相应探针底物(非那西丁、安非他酮、双氯芬酸钠、奥美拉唑、阿莫地喹、右美沙芬、咪达唑仑)的血浆样品分析方法;其次,将48只SD雄性大鼠随机平均分为8组:其中四组为PS80尾静脉给药组:生理盐水组、PS80低、中、高剂量组(75,150,300 mg/kg),连续14天经尾静脉注射PS80;其余四组为PS80灌胃给药组:超纯水组、PS80低、中、高剂量组(250,500,1000 mg/kg),连续20天灌胃灌胃给PS80。每一组于最后一天给药后,各组大鼠分别经尾静脉注射混合探针药物溶液,于设定的时间点自大鼠眼底静脉丛采血,用LC-MS/MS方法测定不同组大鼠血浆中7种探针底物的血药浓度,并用DAS2.0软件计算各组探针底物的主要药代动力学参数,并进行统计学分析,考察PS80对大鼠Cyp450酶活性的影响;同时,另取48只SD雄性大鼠随机平均分为8组,同上述同样分组给药,于最后一天将大鼠颈椎脱臼处死,取肝组织,用荧光定量PCR测定各组中主要细胞色素P450酶亚型的m RNA相对表达水平,分析PS80对大鼠体内该7种Cyp450酶的基因表达水平是否有影响。结果:本研究建立了一种同时测定大鼠血浆中7种探针底物非那西丁、安非他酮、双氯芬酸钠、奥美拉唑、阿莫地喹、右美沙芬和咪达唑仑的LC-MS/MS分析方法,经方法学验证后可行;PS80对大鼠体内细胞色素P450的酶活性及m RNA表达结果结果基本相一致:1.PS80尾静脉给药组:(1)PS80中、高剂量组显著抑制了Cyp1a2、Cyp2c11酶的活性及下调了其m RNA的表达;(2)PS80中、高剂量组显著抑制了Cyp2b1酶的活性且PS80低、中、高剂量组均显著下调了其m RNA的表达;(3)PS80高剂量组显著抑制了Cyp3a1酶的活性及下调了其m RNA的表达;(4)PS80各剂量组对Cyp2c7、Cyp2c6、Cyp2d2的酶活性及m RNA表达水平均无显著影响。2.PS80灌胃给药组:(1)PS80低、中、高剂量组显著抑制了Cyp2b1酶的活性及下调了其m RNA的表达;(2)PS80低、中、高剂量组显著抑制了Cyp1a2酶的活性且PS80中、高剂量组均显著下调了其m RNA的表达;(3)PS80中、高剂量组显著抑制了Cyp2c11酶的活性并下调了其m RNA的表达;(4)PS80高剂量组显著抑制了Cyp3a1酶的活性及下调了其m RNA的表达;(5)PS80各剂量组对Cyp2c7、Cyp2c6、Cyp2d2的酶活性及m RNA表达水平均无显著影响。结论:PS80对大鼠Cyp450酶活性及m RNA表达的具有一定的影响,除Cyp2c7、Cyp2c6、Cyp2d2以外,PS80对Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c11和Cyp3a1酶均呈现不同程度的抑制作用。总之,本研究表明当PS80同经Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c11和Cyp3a1酶(人体中的CYP1A2、CYP2B6、CYP2C19和CYP3A4)代谢的底物联用时,应充分考虑PS80与这些底物可能发生的相互作用,避免不良反应的发生。