低浓度H2O2促进兔角膜培养上皮细胞黏附及移行的离体实验研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xfcll
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:细胞黏附及移行是角膜上皮创伤愈合的关键步骤,该过程依赖于整合素(integrin)及其配体纤维连接素(fibronectin)的信号作用系统。在细胞黏附于细胞外基质的过程中,活性氧(Reacive oxygen species,ROS)是整合素信号系统所必需的胞内产物。本研究旨在通过体外实验观察外源性低浓度过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)对兔培养角膜上皮细胞黏附及移行作用。 方法:采取新西兰大白兔的角膜缘作为原代细胞培养的组织片。除培养细胞外,本研究实验均使用无生长因子以及无血清的培养液。四甲基偶氮比色(measurement of trititaed thymidine incorporation,MTT)细胞活力测试法用于检测外源性H2O2(0,1,5,10,20,50,60,和70μM)作用兔角膜上皮细胞2小时及24小时后的细胞活性。在适宜H2O2浓度范围内,黏附离心法用于测试黏附30和60分钟后的细胞数量。在此基础上,进一步用抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)作为外源性H2O2拮抗药,再测试黏附细胞的数量。选取最佳H2O2浓度组与非H2O2处理组,拍照记录两组细胞黏附15,30,以及60分钟时的细胞形态,以比较两组的变化差异。免疫荧光法被用于以上两组细胞在30分钟时的黏着斑蛋白(vinculin),以及丝状肌动蛋白(F-actin)表达的测定。离体创伤愈合实验证明外源性低浓度H2O2对培养的细胞移行,以及创伤愈合的作用。 结果:本研究的所有实验取用原代培养的兔角膜上皮细胞第2~3代。低于50μM的外源性H2O2作用细胞2小时及24小时,不降低细胞活性;而70μM H2O2则显著性地下降细胞活性(p<0.05)。黏附离心法结果显示,低浓度H2O2对细胞黏附30和60分钟时的促进作用具有明显的剂量依赖关系:5~50μM H2O2显著性地促进细胞黏附(p<0.05),其中20μM是促进的峰值;而60μM H2O2抑制细胞黏附(p<0.08);NAC可显著性地拮
其他文献
为了解夜间温度对西瓜嫁接苗生长的影响,本试验将育苗期分为3个阶段,并分别设置了4个不同的夜温,研究育苗各阶段不同温度下西瓜嫁接苗的生长情况。试验结果表明,从砧木播种至
对北方6个主要旅游城市冬季入境旅游市场进行BCG模型分析。结果表明,整体市场中,北京为金牛市场,天津、大连为明星市场,沈阳、长春为幼童市场,哈尔滨为瘦狗市场。外国人市场
煤矿井下的皮带输送机在工作过程中经常会出现打滑现象,为了能解决皮带输送机的打滑问题,对引起皮带打滑的原因进行了分析,并充分结合分析结果提出了一种能够对系统继发动作,
去年,我接手高二文科班。如何营造文科班浓郁的文化氛围?如何让文科生亲近古典文化?如何让文科生练就出色的的口才?如何让他们自觉地省察人生、思考生活?
目的 豚鼠作为理想的耳科动物实验模型,目前国内外均未见有关其线粒体DNA大片段缺失的报道。本研究旨在探索老年及老年聋豚鼠mtDNA大片段缺失的位点及其大小,建立老年豚鼠mtD
厌学是学生群体中普遍存在的问题,且存在纵向的时间关联。要解决学生的厌学问题,就要先明确儿童厌学的原因。目前来说,功利主义的教育价值观、教育与儿童生活脱离、学习成就
中医一般思维方法,有的与社会科学的思维方法相互渗透,有的与其他自然科学的思维方法相互联系,有的则完全是中医学所独有的。中医一般思维方法在中医理论和临床中占有十分重要的
利用矿井安全监控系统的数据采集功能,通过对实时监测的各地点瓦斯监测数据分析计算,基于未确知测度理论和大数据算法,生成监测点动态高峰均值,进而形成日动态高峰均值和周动
增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是视网膜脱离手术的主要并发症和手术失败的主要原因,常导致严重的视力损害。玻璃体手术的开展虽然几乎能使各种复杂的视网膜脱离达到解剖复位,
<正>《中藏经》又名《华氏中藏经》,疑为华佗弟子将华佗所授理法方药集腋成裘、自珍自用之作,实为课徒用书。其学术思想渊源于《内经》、《难经》,而以形证脉气决生死,以脏腑