害虫防治是农业生产中的一项重要的任务,苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)作为一种与环境友好的微生物杀虫剂,具有巨大的应用前景,在绿色植保中扮演了重要的角色。除用作杀虫剂之外,Bt杀虫基因还被应用于转基因抗虫作物的开发。目前,crylA基因的抗虫棉花在中国已经得到广泛的种植,有效的解决了棉铃虫对棉花生产的危害。但是随着转基因抗虫作物的大面积种植,害虫的抗药性上升风险不断增大,向害虫防治提出了新的挑战。本文以筛选可用于杀虫剂开发与应用的具有高活性并且与cry1A类基因无交互抗性的菌株为目的,依据与cry1A类无交互抗性的cry基因序列,通过聚类分析已知与cry1A类基因无交互抗性的的基因设计了8对鉴定引物,通过PCR的方法鉴定了实验室保存的192株对鳞翅目具有高毒力的菌株,鉴定出了15株对鳞翅目具有高毒力的的菌株。对这15株菌株进行质粒图谱分析,这15株菌株可分成8种类型,对其基因型鉴定,包含的基因类型有：cry1B、cry1C、cry1D、cry1I、cry2A和cry9类基因；电镜观察晶体形态包含：双锥体形、方形、球形；SDS-PAGE分析其中一株既表达130ku的蛋白又表达60ku左右的蛋白,一株同时表达130ku和70ku左右的蛋白,其余菌株均表达130ku左右的蛋白并对胞晶混合物中的晶体蛋白含量进行定量分析。选取了目前生产菌株KN11为对照,对这8株菌株进行了甜菜夜蛾、小菜蛾、敏感棉铃虫、CrylAc抗性棉铃虫的的生物活性测定。这8株菌株对小菜蛾均表现出较高的杀虫活性,其中菌株PS4-E12对小菜蛾的杀虫活性要比对照菌株KN11高近4倍；3株菌对甜菜夜蛾幼虫具有高毒力,其中菌株PS3-C2对甜菜夜蛾LC50值为1.87μg·mL-1;对敏感棉铃虫具有高毒力的菌株4株(PS4-E12、PS1-F11、SCL-B3、PS8-B6);初步筛选出对cry1Ac抗性棉铃虫无交互抗性的菌株6株(PS3-C2、PS1-F11、SCL-B3、PS8-B6、PS4-E12、MO3-E5),但结果需进一步验证。通过GenBank成功设计了Bt菌株的几丁质酶基因的鉴定引物,并利用PCR的方法鉴定了菌株中的几丁质酶基因,这8株菌株中均含有几丁质酶基因。同时测定了各菌株的生长状态,各菌株在生长速率上没有表现出差异性。本研究在菌株特性、生长曲线、活芽胞计数、杀虫活性等方向对菌株进行了评估,研究结果对Bt新菌株的选育和开发具有重要的意义。