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目的:观察糖尿病对大鼠血-脊髓屏障(BSCB)紧密连接Occludin蛋白表达的影响,以及不同病程阶段的变化趋势,从分子水平探讨糖尿病对BSCB产生损害的机制。
方法:SD大鼠22只,随机分为:正常组(n=8),1个月糖尿病组(n=8)和3个月糖尿病组(n=6),共3组。糖尿病大鼠模型采用链脲佐菌素腹腔注射。采用免疫组织化学ABC法观察脊髓组织切片Occludin蛋白表达的改变;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定脊髓组织Occludin蛋白mRNA的水平;Western blot方法测定脊髓组织紧密连接Occludin蛋白质水平的变化。
结果:Occludin蛋白主要存在于正常脊髓组织的毛细血管的内皮细胞膜上。糖尿病1个月组,Occludin蛋白的mRNA水平(0.20±0.21)较正常组(1.00±0.00)显著降低,在糖尿病3个月组,其值(0.06±0.02)较正常组进一步降低(P<0.05)。在1个月糖尿病组,Occludin的蛋白质水平(0.53±0.01)较正常组(0.92±0.66)显著降低,在3个月糖尿病组,Occludin的蛋白质水平(0.31±0.01)较正常组进一步降低(P<0.05)。
结论:糖尿病可以使血-脊髓屏障紧密连接Occludin蛋白含量降低,随着病程的延长其含量的降低越明显。提示糖尿病使血-脊髓屏障Occliudin蛋白的降低,可能导致血-脊髓屏障通透性的改变。