不同氨基酸和免疫增强剂的互作对保育猪生长发育及免疫应激性能的影响

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本研究选用杜长大保育猪为试验材料,就不同氨基酸和免疫增强剂(黄芪多糖、益生菌)的互作对保育猪生长性能、免疫性能、猪瘟抗体水平、肠道黏膜免疫系统发育的影响进行比较分析,并利用大肠杆菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)以模拟仔猪免疫应激状态,旨在揭示保育猪在不同氨基酸和免疫增强剂的互作下的抗病力及抗应激差异的免疫学机理,并确定氨基酸和免疫增强剂的最佳组合;为养猪从营养免疫角度来寻找更健康、更安全的饲养管理方法和抗生素替代思路提供依据。本试验研究分为三个部分。第一部分:不同氨基酸与免疫增强剂对保育猪生长发育及抗应激能力影响的研究。选择31±1日龄健康的保育猪675头,将试猪随机分为9个组,每个组3个重复(栏),每个重复25头猪,公母比例接近。试验采用2×4多因素完全随机化试验设计,分别是在基础日粮中添加0.14%苏氨酸(Thr)、0.15%蛋氨酸(Met)、0.86%精氨酸(Arg)、1.0%谷氨酰胺(Gln)与0.03%黄芪多糖(APS)、0.15%益生素,两两相互组合,共8个试验处理组,1个基础日粮对照组。试验期30天,分为饲养试验(25d)和LPS免疫应激试验(5d)两阶段。试验结果表明:(1)生长性能:Thr、Met、Arg与APS、益生菌的互作对提高仔猪日增重无显著作用(P>0.05);而Gln与APS、益生素的互作能显著促进仔猪的生长性能(P<0.05);(2)生化指标:各组合的互作对应激前仔猪机体的尿素氮、总胆固醇和甘油三酯等的含量无显著影响.(P>0.05),但Gln+益生素、Arg+APS能显著抑制应激后尿素值的升高(P<0.05);(3)血清酶活性:应激前Met+益生素、Arg+APS能显著促进r-谷氨酰转肽酶(GGT)升高(P<0.05),Gln+APS极显著提高谷丙转氨酶(AIL)(P<0.01),而LPS应激后Gln+APS组的GGT、AIL均极显著下降(P<0.01);(4)抗氧化指标:应激前,各组合均不同程度促进了血清中丙二醛(MDA)的升高,Thr+APS组影响极显著(P<0.01),Thr+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Met+APS、Arg+APS组影响显著(P<0.05),而应激后各组合极显著抑制了MDA的升高(P<0.01),其中Met+APS组抑制效果最优。(5)体液免疫指标:各组合对总蛋白、白蛋白、球蛋白等指标在应激前后均无显著影响(P>0.05),而精Arg+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Thr+APS等组极显著地促进了免疫球蛋白g(IgG)的升高,同时又极显著地抑制了应激后IgG的下降(P<0.01);(6)血液生理指标:应激前后,各试验组合对白细胞、嗜碱性粒细胞、红细胞、红细胞压积等指标无显著影响(P>0.05);(7)生长激素和促生长因子:应激前,各组合均极显著地促进血液中生长激素(GH)、生长抑素(SS)的升高(P<0.01),以Gln+APS、Arg+益生素对GH的效果最好,而G1n+益生素对SS的影响最大,而对胰岛素样生长因子1(IGF-1)无显著影响(P>0.05);应激后,各组合仍能显著促进GH的上升(P<0.05),而以Met+APS、Met+益生素、Arg+益生素效果最好,而Gln+APS、Gln+益生素、Met+益生素组极显著抑制了SS的上升,同时Thr+APS、Arg+APS、Met+APS组也极显著促进了IGF-1的升高(P<0.01)。(8)炎性细胞因子:应激前,G1n或Arg+益生素均显著促进血液中Y-干扰素(Y-IFN)的升高,而Met+APS或益生素的组合又显著抑制γ-IFN的升高(P<0.05),而各组合均能显著降低血液中白细胞介素1β(IL-1β)的含量,其中以Arg+APS或益生素、Gln+APS、Met+APS效果最好,而Thr+APS、Arg+APS或益生素等三组显著促使仔猪肿瘤坏死因子a(TNF-α)的升高;而应激后,Met+APS或益生素组合均极显著促进γ-IFN的升高(P<0.01),除Thr组外,其余组对IL-1β的上升有显著影响(P<0.05),而Thr、Arg等组均极显著抑制猪肿瘤坏死因子α的上升(P<0.01)。结果说明,各组合对猪生长性能无显著促进作用,但Arg、Gln与APS、益生菌的互作对调节仔猪的免疫性能有显著促进作用,同时APS在调节机体体液免疫、抗应激方面要显著优于益生菌。第二部分:不同氨基酸与免疫增强剂的互作对保育猪小肠形态学发育及盲肠内微生物的影响。试验设计同第一部分。在试验结束后,每组每重复选1头健康猪只屠宰,采集十二指肠、空肠和回肠肠段、肠粘膜以及盲肠粪便等样本,用于肠形态学、黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、微生物数量等指标的检测。结果表明:(1)不同氨基酸与黄芪多糖、益生菌的互作对十二指肠肠绒毛长度、宽度及绒毛高度/隐窝深度有显著影响(P<0.05),其中以Gln+APS、Gln或Arg+益生菌组对提高小肠绒毛长度、宽度及绒毛高度/隐窝深度比值方面作用效果最强;(2)各组合均能显著促进肠道SIgA的分泌,其中Gln或Thr或Arg+益生素、Gln+APS等四组具有极显著地促进作用(P<0.01);(3)各组合均有抑制肠道大肠杆菌繁殖,促进乳酸杆菌繁殖的作用趋势,其中G1n或Arg+益生素组效果显著(P<0.05)。说明谷氨酰胺、精氨酸与益生菌的互作对肠黏膜免疫系统的发育及其功能的完善具有全面显著的促进作用。第三部分:不同氨基酸与免疫增强剂对保育猪猪瘟抗体水平及变化趋势的影响研究。设计同第一部分。根据猪场具体免疫程序,28日龄时,各个组首免猪瘟疫苗,首免前3天及首免后第7d、15d、22d(即试验猪25日龄、35日龄、42日龄、49日龄)时,前腔静脉采血,分离血清,用于猪瘟抗体检测。结果表明:猪瘟首免前和免后前2周各处理组与对照组比差异均不显著(P>0.05)。而在免后第3周(即49日龄),各处理组与对照组的差异有进一步拉大的趋势,其中对于免前阳性组(免疫前抗体呈阳性),各添加组仔猪抗体阻断值下降的速率有所减缓,而对于免前阴性组,Gln+APS、Thr+APS的互作对猪瘟抗体的生成具有显著促进作用(P<0.05)。
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