背景 心房颤动(Atrial Fibrillation,AF,简称房颤)是一种常见的快速性心律失常,已成为严重危害中国公众健康的疾病之一。房颤可增加脑卒中风险且为其独立危险因素。无论是否抗凝治疗,亚裔房颤患者较其他人群更易于发生缺血性脑卒中。目前临床上应用2016年AHA/ACC/HRS房颤指南中推荐的CHA2DS2-VASc评分系统来评价非瓣膜性房颤患者脑卒中风险。随着遗传因素对疾病的影响逐渐被重视,国内外已分别报道了房颤、脑卒中及房颤相关脑卒中的基因多态性关联分析,但考虑到房颤及脑卒中为多因素复杂疾病,与其发病相关的多态性位点只能解释一部分遗传变异,出现这种遗传度丢失的原因之一可能为忽略了多个微效基因产生的基因-基因相互作用。目前影响房颤患者发生脑卒中的基因-基因相互作用鲜有报道。探究基因-基因相互作用对于构建预测房颤患者发生脑卒中的遗传风险评估模型,开发房颤患者个体化基因治疗靶点,降低房颤危害具有重要意义。目的 分析中国大连地区汉族人群CYP2C9、HABP2、ABO、HDAC9基因多态性,评估位点间基因-基因相互作用,探索相互作用对房颤合并脑卒中的影响。可能对房颤患者发生脑卒中事件进行更好的评价、预防,为心源性脑卒中的诊断和基因个体化治疗带来了新的方向。方法 采用病例对照设计,在大连医科大学附属第二医院心内科及神经内科病房的住院患者中连续选入99名中国汉族房颤患者,分成房颤合并缺血性脑卒中组(简称房颤卒中组,n=60)及房颤无卒中对照组(简称房颤对照组,n=39)。所有患者具有心电图诊断依据,缺血性脑卒中患者均符合WHO诊断标准,头颅CT、MRI明确有责任梗死病灶。采集入选病例的临床资料、病史及外周静脉血2-3ml。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测CYP2C9基因rs1057910、HABP2基因rs11196288、ABO基因rs505922以及HDAC9基因rs2107595多态性位点核苷酸序列多态性(SNP)并确定基因型。分别对各SNP的基因频率、基因型频率行Rx C列联表卡方检验或Fisher确切概率检验来统计分析。脑卒中及房颤危险因素包括年龄、高血压病史、糖尿病史以及冠心病病史等,应用二分类logistic回归分析来校正以上具有显著性的危险因素对基因频率的影响,从而进一步评估各候选位点与房颤病人发生脑卒中事件的关联性。采用广义多因子降维法(GMDR)以进行交叉检验来评价四个位点相互作用强度,选出具有统计学意义的模型,再比较各个模型之间的交叉验证一致性等指标,并确定最佳相互作用模型。结果 与房颤对照组相比,房颤卒中组患者年龄更大(78.38±7.75,P=0.000)、冠心病明显偏多(P=0.047),而两组高血压病、糖尿病无明显差异(P>0.05)。本研究中仅CYP2c9 rs1057910基因频率偏离哈迪-温伯格平衡(P=0.00),其他三个基因均未偏离HWE。多态性位点之间无连锁不平衡证据(r~2<0.01)。rs1057910与rs11196288同在第10号染色体,应用SHEsis分析计算二者D’=0.240,r~2=0.001,不支持两位点存在连锁不平衡关系。应用二分类logistic回归分析来校正混杂因素年龄、冠心病等,仅rs505922-CT型与房颤卒中组有相关性[P=0.040,OR=0.261,95%CI(0.073-0.938)]。进一步将房颤卒中组分为心源性卒中亚组(n=28)及其他卒中亚组(n=32),使两组分别与房颤对照组比较,rs505922-CT型与房颤合并其他卒中有相关性[P=0.045,OR=0.248,95%CI(0.063-0.970)],但与心源性脑卒中无明显关联[P=0.102,OR=0.272,95%CI(0.057-1.294)]。利用GMDR构建房颤卒中组与其他卒中亚组的联合作用模型,两组的最佳模型中均包含HABP2,ABO,HDAC9三个基因,但均未达到统计学意义。将最佳模型内三个SNPs及显著性因素(如年龄、冠心病)纳入logistic回归分析来探究三个基因对房颤病人脑卒中发病的共同作用,但结果均未达到统计学意义。结论 本研究结果表明在中国大连地区汉族人群中,位于ABO基因中的SNP rs505922-CT型与房颤病人出现缺血性脑卒中具有关联性,但可能归因为除心源性脑卒中以外的卒中分型。本试验没有发现rs11196288、rs505922、rs2107595及rs1057910位点存在基因-基因相互作用,位点的共同作用可能与脑卒中发病无关。