【摘 要】
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目的:筛选并检测HOXB2在胃腺癌中的表达水平,并与相应的临床病理学资料相结合,分析HOXB2对于胃腺癌患者各临床病理学特点及生存的影响,探究HOXB2对胃腺癌细胞系增殖的作用。方法:利用人类基因表达谱芯片筛选在胃腺癌中有异常表达的HOXB2基因。收集2019年1月至2019年4月青岛大学附属烟台毓璜顶医院胃肠外科收治的经手术切除、病理诊断明确的胃腺癌及相应正常胃组织的手术标本总计60例,应用实时
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目的:筛选并检测HOXB2在胃腺癌中的表达水平,并与相应的临床病理学资料相结合,分析HOXB2对于胃腺癌患者各临床病理学特点及生存的影响,探究HOXB2对胃腺癌细胞系增殖的作用。方法:利用人类基因表达谱芯片筛选在胃腺癌中有异常表达的HOXB2基因。收集2019年1月至2019年4月青岛大学附属烟台毓璜顶医院胃肠外科收治的经手术切除、病理诊断明确的胃腺癌及相应正常胃组织的手术标本总计60例,应用实时荧光定量PCR（RT-q PCR）、免疫蛋白印迹（Western blot）技术检测样本中的HOXB2m RNA及蛋白水平。回顾性收集自2013年1月至2014年12月青岛大学附属烟台毓璜顶医院收治的经手术切除、病理学诊断明确的胃腺癌及相应的正常胃组织术后病理切片总计114例,应用免疫组织化学染色（IHC）技术检测其HOXB2表达水平,并分析其与临床病理学资料及生存时间的相关性,应用Kaplan-Meier法做生存分析,Log-rank法检验。应用基因敲减技术建立HOXB2基因敲减胃腺癌细胞系,观察HOXB2对于AGS胃腺癌细胞系增殖的影响。结果:1.人类基因表达谱芯片筛选结果显示:与正常胃组织相比,HOXB2基因在胃腺癌中的表达是正常胃组织的6.29倍（P<0.01）。2.RT-q PCR检测结果显示:HOXB2m RNA在胃腺癌组织（1.329±0.484）表达高于正常胃组织（1.129±0.582）,二者差异有统计学意义（P<0.05）。3.Western blot检测结果显示:HOXB2蛋白表达水平在胃腺癌组织表达水平为（0.675±0.178）高于正常组织中的（0.614±0.193）,差异有统计学意义（P<0.01）。4.免疫组织化学染色结果分析显示:HOXB2在胃腺癌组织中表达率为64.9%（74/114）高于正常胃组织中的表达率28.9%（33/114）,二者差异有统计学意义（P<0.001）;其中胃腺癌组高分化腺癌阳性率为31.6%（6/19）,中分化腺癌阳性率为65.6%（40/61）,低分化腺癌阳性率为82.4%（28/34）,三者差异具有统计学意义（P=0.001）,提示组织分化越差,HOXB2蛋白表达量越高。5.单因素分析显示:HOXB2蛋白表达水平与浸润深度、TNM分期、肿瘤大小及肿瘤分化程度相关（P<0.05）;而与年龄、性别、淋巴结转移、肿瘤位置、脉管癌栓、神经浸润、远处转移无相关性。6.二元Logistic回归分析显示:TNM分期和肿瘤分化程度是HOXB2表达水平的独立影响因素;Kaplan-Meier生存分析提示HOXB2基因阳性组5年生存率为23.4%,低于HOXB2基因阴性组42.4%（P<0.05）。7.建立HOXB2基因敲减细胞系;CCK8实验结果显示:在培养的第48h、72h和96h,HOXB2基因敲减细胞组增殖情况较空白对照组明显减缓,差异有统计学意义（均P<0.05）。结论:HOXB2基因在胃癌组织中表达高于正常组织,HOXB2的表达水平与TNM分期和肿瘤分化程度相关;HOXB2表达阳性组生存时间更短,HOXB2基因敲减可降低胃癌细胞增殖。这提示HOXB2可能参与胃腺癌的发生、发展过程,可能成为评估胃腺癌预后的参考指标。
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