【摘 要】
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植物次生细胞壁的合成代谢是由复杂的基因调控网络所控制的。在这些调控过程中,转录因子起到了重要作用。在一些模式植物如拟南芥中,陆续有较多的转录因子被鉴定参与次生细胞
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植物次生细胞壁的合成代谢是由复杂的基因调控网络所控制的。在这些调控过程中,转录因子起到了重要作用。在一些模式植物如拟南芥中,陆续有较多的转录因子被鉴定参与次生细胞壁的合成调控,一些网络关系也正在逐渐被揭示。这其中,MYB转录因子家族有较多的基因被证实参与次生细胞壁调控。而在水稻中,有关次生细胞壁合成的MYB转录因子的报道则相对较少。实验室已建立有OsMYB103L突变体以及超表达和RNAi水稻转基因株系。本课题旨在鉴定出OsMYB103L在次生细胞壁基因调控网络中的位置以及筛选网络中的其他MYB转录因子。本研究在实验室已有的OsMYB103L突变体及其芯片数据的基础上,挑选了与水稻次生细胞壁合成相关功能基因共表达系数较高的水稻MYB转录因子,通过转基因手段验证他们的功能。通过ChIP-seq筛选OsMYB103L可能直接调控的下游基因。实验主要结果概括如下:1.根据OsMYB103L突变体芯片数据,挑选了 8个与水稻次生壁相关功能基因共表达系数较高的,而且在抽穗期表达量较高的水稻MYB转录因子;2.构建所挑选的MYB转录因子的超表达和RNAi载体,通过农杆菌介导的转基因方法转化水稻愈伤,筛选出T0代阳性苗;3.转基因植株中OsMYB86.1的RNAi植株呈现叶片向远轴面卷曲的表型,且花粉活力明显下降;OsMYB61.2的RNAi植株呈现抽穗期后的叶片向远轴面卷曲表型;4.合成了 OsMYB86.1和OsMYB103L的多克隆抗体,并鉴定了其特异性;5.用OsMYB103L的多克隆抗体,NPB抽穗期倒数第1,2,3节茎杆进行ChIP-seq实验,初步筛选出了 OsMYB103L可能直接调控的下游基因,揭示了其在水稻次生细胞壁合成调控网络中的位置。
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