长链非编码RNAAFAP1-AS1通过Wnt5a-RhoA通路促进子宫内膜异位症发生发展的研究

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子宫内膜异位症简称内异症(Endometriosis,EM),是严重危害女性健康的妇科疾病,但其发病原因至今还不明确。研究发现,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与内异症关系密切,参与该疾病的发生发展。我们前期研究发现,lncRNA AFAP1-AS1在异位内膜组织中的表达比正常内膜组织高,其下调对内异症的发生发展有抑制作用,但具体作用机制尚不明确。本研究对AFAP1-AS1在内异症中的功能进行初步的验证,检测Wnt5a-RhoA通路相关分子在内异症中的表达情况,探索RhoA分子激动和抑制对在位内膜间质细胞生物学行为的影响,观察异位内膜间质细胞AFAP1-AS1敲低后Wnt5a-RhoA通路相关分子基因和蛋白表达的变化,并研究外源性添加Wnt5a蛋白和RhoA抑制剂对敲低AFAP1-AS1的异位内膜间质细胞生物学行为的影响。最后,观察雌激素对AFAP1-AS1及其下游分子表达的影响。主要研究结果如下:(1)AFAP1-AS1在异位组织中高表达,促进异位内膜间质细胞迁移和侵袭。(2)内异症异位组织中Wnt5a、RhoA、ROCK1、ROCK2的基因和蛋白表达均较正常内膜高,异位组织中Wnt5a和RhoA的基因表达和AFAP1-AS1存在显著相关性,对RhoA分子的激动和抑制后分别可以促进和抑制在位内膜间质细胞的增殖、迁移和侵袭。(3)异位内膜间质细胞中敲低AFAP1-AS1后,Wnt5a、RhoA、ROCK1、ROCK2的基因和蛋白表达均下降。Wnt5a蛋白和RhoA抑制剂分别促进和抑制敲低AFAP1-AS1的异位内膜间质细胞增殖、迁移和侵袭能力,但共同作用时Wnt5a的促进作用被下游的RhoA抑制剂抵消。(4)雌激素可以促进正常内膜间质细胞AFAP1-AS1及其下游蛋白的表达。总结以上研究,内异症异位组织中AFAP1-AS1和Wnt5a-RhoA通路相关的分子表达均增高,且RhoA能促进内异症的发展。AFAP1-AS1促进内异症的发生发展,其分子机制和Wnt5a-RhoA通路有关。雌激素可以促进正常内膜间质细胞AFAP1-AS1及其下游蛋白的表达,提示AFAP1-AS1在内异症中的调控作用和雌激素紧密相关。
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