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压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)是指既不是逼尿肌收缩压,又不是由于膀胱壁对尿液的张力压作用引起的,咳嗽、大笑等腹压增加的情况下,尿液不自主流出的病理现象。SUI常与生殖器官的膨出和脱垂相伴发生,给患者的日常生活带来很大的影响,使患者的生活质量明显下降,并造成了严重的社会经济负担。女性压力性尿失禁的发病原因很复杂,有多种因素参与,国内外学者从解剖学、形态学、功能学等方面对SUI的发病机制进行了大量研究,但其确切机制仍未阐明。多种研究表明盆底支持组织中结缔组织的结构功能改变可能对SUI的发生具有重要的作用。Fibulin-3(即EFEMP1)是人体组织发育过程中广泛表达的一种细胞外糖蛋白,属于Fibulin蛋白家族。Fibulin-3能与ECM1、TIMP-3、CollagenⅩⅧ和原弹性蛋白等相互作用,对于保持基膜的完整性以及稳定细胞外基质(extracellar matrix,ECM)结构发挥着重要作用。组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)是一个多基因编码的分泌型蛋白家族,是基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的天然特异性抑制物,通过与MMPs特异性结合,维持细胞外基质的稳定状态。盆底结缔组织主要由韧带和筋膜组成,它的机械特性和支持性由构成组织的分子如胶原(collagen)、弹性蛋白(elastin)、蛋白聚糖和糖蛋白的结构、组成比例以及彼此之间的相互作用决定。其中胶原和弹性蛋白作为结缔组织的主要成分,在维持盆底支持组织的功能上起重要作用。既往对盆底功能障碍结缔组织的研究主要集中在胶原的变化；有研究表明盆底功能障碍患者阴道壁中与弹性蛋白代谢有关的基因发生变化,提示弹性蛋白重塑可能在SUI发生中具有一定的作用。目的本研究采用免疫组化(S-P)法检测Fibulin-3、TIMP-3和elastin在女性SUI患者阴道壁结缔组织中的表达水平,并进行各个指标间的相关性分析,从而进一步探讨、分析盆底支持组织结构和代谢的变化在SUI发生、发展中的作用。材料与方法1材料选择2009年8月-2010年2月在郑州大学第三附属医院妇科住院手术治疗的患者,其中压力性尿失禁患者(SUI组)30例,盆底器官脱垂患者(POP组)30例,良性妇科疾病患者(对照组)30例。三组患者均符合诊断,无既往盆底手术史。SUI组行经闭孔无张力尿道中段悬吊术(trans-obturator vaginal tape, TVT-O)、TVT-S术或阴道前壁修补术；POP组行前盆底悬吊术或阴道前壁修补术；对照组行阴式或腹式子宫切除术。术中切取患者阴道前壁上段12点处全层组织约0.5cm×0.5cm×0.5cm大小。2方法采用免疫组织化学法检测SUI组、POP组和对照组患者阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin的表达情况。3结果判定应用电子计算机图像分析系统分析三组患者阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin免疫组织化学阳性染色区平均灰度值。在图像分析中,免疫组织化学染色的强弱与灰度值呈正比关系,阳性物质越高,染色越深,灰度值越大,反之越小。4统计学分析所得数据经Excel 2003录入,建立数据库,各组数据的平均灰度值均以x±S表示,应用SPSS16.0软件包进行统计分析。计量资料各组间的均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD检验。采用Pearson相关分析来分析各指标间的相关性。以上检验方法均以a=0.05作为检验水准。结果1.免疫组化染色结果三组患者阴道壁组织中均可见Fibulin-3蛋白、TIMP-3蛋白和elastin蛋白的表达,呈淡黄色至棕黄褐色。Fibulin-3蛋白和elastin蛋白主要表达于细胞外基质,呈淡黄色至棕黄褐色弥漫性分布；TIMP-3蛋白主要表达于胞浆,细胞浆中呈现淡黄色至棕黄褐色颗粒的细胞为阳性细胞。2. Fibulin-3蛋白的表达①Fibulin-3蛋白在SUI组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),②Fibulin-3蛋白在POP组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),③Fibulin-3蛋白在SUI组和POP组间的表达无明显差异(P>0.05)。3. TIMP-3蛋白的表达①TIMP-3蛋白在SUI组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),②TIMP-3蛋白在POP组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),③TIMP-3蛋白在SUI组和POP组间的表达无明显差异(P>0.05)。4. Elastin蛋白的表达①Elastin蛋白在SUI组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),②Elastin蛋白在POP组中的表达明显低于对照组,有统计学差异(P<0.05),③Elastin蛋白在SUI组和POP组间的表达无明显差异(P>0.05)。5.相关性分析SUI组Fibulin-3与TIMP-3的表达呈正相关(r为0.734,P<0.05),TIMP-3与elastin的表达呈正相关(r为0.718,P<0.05)。结论阴道壁组织中Fibulin-3、TIMP-3和elastin表达降低,共同参与SUI的发生。