热疗联合同步放化疗后肺腺癌A549细胞的活性变化

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目的近年文献上关于肺癌的治疗使用热疗联合化疗或热疗联合放疗的报道较多,但三者联合的理论研究报道较少。本实验将热疗、化疗与放疗三者联合作用于肺腺癌A549细胞,观察其存活率,为临床上三者联合应用治疗肺癌提供实验依据。方法将呈对数期且生长状态良好的肺腺癌A549细胞随机分组:①空白对照组:更换培养液后,在培养箱中培养48h;②放化疗组:加入含药物浓度为1.25×10-10mol/L的多西他赛的细胞培养液中培养24h,再给予6GY的高能量6MVX线照射,继续培养24h;③热疗联合放化疗组:加入含药物浓度为1.25×10-10mol/L的多西他赛的细胞培养液中培养24h,给予不同温度热疗,包括38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃,在恒温水浴箱中加热1h后,再给予6GY的高能量6MVX线照射,继续培养23h。上述三组按规定时间培养完成后,用MTT法测细胞增殖情况,流式细胞仪检测肺癌A549细胞凋亡率,并且应用Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果(1)通过MTT法测定的肺腺癌A549细胞存活率:当热疗温度≤39℃时,存活率稍高于放化疗组,与放化疗组相比,差异无统计学意义(P>0.05);之后随着温度的升高,即当温度≥40℃,肺腺癌A549细胞的存活率逐渐降低,与放化疗组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。当热疗温度≤39℃时肺腺癌A549的存活率高于放化疗组,因未见文献报道该温度对放疗疗效的降低作用,有相关文献报道热疗温度≤39℃时可能会降低紫杉醇对肺腺癌A549细胞的作用[30],故考虑该温度可能会降低多西他赛对肺腺癌A549细胞的作用,有待进一步研究。(2)流式细胞仪测肺腺癌A549的凋亡显示:43℃联合放化疗后较放化疗后的细胞凋亡明显。(3) Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达显示:43℃联合放化疗后较放化疗后Bcl-2的表达明显减少,而Bax的表达明显增高。结论(1)热疗温度≤39℃时肺腺癌A549的存活率高于放化疗组,提示该温度可能会降低多西他赛对肺腺癌A549的作用。(2)当热疗温度≥40℃时,与放化疗联合,治疗效果较好,43℃时效果最佳。
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