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第一部分 不同细胞因子组合对人脐血CD34~+造血干/祖细胞体外诱导树突状细胞的比较 目的 比较人脐血CD34~+造血干/祖细胞在不同细胞因子组合的培养体系中诱导为DC的扩增效率及DC功能,寻找DC体外诱导扩增的最优细胞因子组合,为后续DC的相关研究建立基础平台。方法 利用免疫磁珠分离法(MACS)分离并纯化脐血CD34~+造血干/祖细胞,体外以重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、肿瘤坏死因子(rhTNF-α)、干细胞集落刺激因子(rhSCF)、FLT3配体(rhFL)等构成的不同细胞因子组合诱导分化为DC。培养过程中观察细胞形态并分析细胞增殖动力学方式,流式细胞检测DC表面分子表达,MLR测定DC体外刺激同种异体T细胞增殖的能力,ELISA法检测DC上清中IL-12分泌。结果 CD34~+造血干/祖细胞在不同细胞因子组合诱导14天后均可见典型DC形态。几种组合中GM-CSF/TNF-α/SCF/FL不仅扩增效率最高(615±21.08倍,P=0.0001),且诱生的DC含量及成熟度最高,高表达各类DC分化相关抗原CD1α(83.76%±8.29%)、CD83(87.94%±6.91%)、CD80(94.3%±0.90%)、CD54(95.46%±1.12%)以及HLA-DR(73.06%±4.05%)等,较其它3组有显著差异(P=0.0001),在体外有很强的刺激同种异体T淋巴细胞增殖和IL-12分泌的能力。结论 GM-CSF/TNF-α/SCF/FL构成的细胞因子组合在体外能促进脐血CD34~+干/祖细胞大量扩增,并使之分化成熟为具有正常功能的DC,是一种理想的体外诱导扩增方案。