TRIM5α作为一种抑制HIV-1复制的细胞因子，首先在恒河猴细胞中被发现。TRIM5α是TRIM5基因编码的六种亚型中的一种，它的结构包括RING结构域、B-box2结构域、Coiled-coil结构域以及其他TRIM5亚型中不具备的位于羧基端的B30.2结构域。病毒外膜与宿主细胞膜融合进入细胞后，病毒衣壳有序解体释放核酸之前，TRIM5α蛋白多聚体可以与病毒衣壳特异性地结合。TRIM5α具有的泛素连接酶活性，使衣壳通过泛素依赖的蛋白酶体途径被降解，病毒衣壳的不成熟解体阻断了病毒的复制周期，从而达到抑制病毒的目的。TRIM5α蛋白的抗反转录病毒活性具有鲜明的种属特异性，与其B30.2域中特定的氨基酸有关。本课题采用重叠PCR定点突变技术，将人的野生型TRIM5α基因B30.2区域的第332位精氨酸突变为亮氨酸、丝氨酸和谷氨酰胺，构建出点突变的TRIM5α真核表达载体。另外将人的野生型TRIM5α进行片段替换，构建出含有TFP基序的TRIM5α真核表达载体。亚细胞定位研究显示野生型及突变型GFP-TRIM5α融合蛋白主要分布在胞浆中，过表达时出现点状聚集的现象。突变位点的存在不影响蛋白质的定位。瞬时表达TRIM5α突变体，同时包含TFP基序和R332P点突变的小片段TRIM5αRHE突变体具有较高的抗病毒活性，突变体R332Q和RH的作用次之，三者的抗HIV-1活性均高于R332P。