基因治疗作为一种根本性的治疗策略,已被证实是治疗癌症、单基因遗传病以及神经系统疾病的有效手段。而递送基因的载体很大程度上决定着基因治疗的成功。阳离子脂质载体作为一类非病毒递送载体,因为生物相容性好、毒性小和易于制备等优点被广泛使用。本文将两种天然氨基酸(谷氨酸和鸟氨酸)进行结合,得到两种阳离子脂质分子DoGo220(分支型)和DoGo310(线型),通过核磁共振氢谱以及质谱分析进行测定;然后,将DoGo220和DoGo310阳离子脂质分子分别与中性脂质卵磷脂、PEG 2000混合得到两种脂质纳米颗粒。通过荧光定量和流式细胞分析法比较DoGo220和DoGo310两种脂质纳米颗粒的基因转染效率,证实DoGo220和DoGo310脂质纳米颗粒均有较好地在细胞内释放核酸的能力,同时DoGo310脂质纳米颗粒在同等条件下显示更高的转染效率;然后,通过荧光猝灭法测定两种脂质分子与si RNA的结合常数(K_D值),结果显示DoGo220,K_D=8.27 n M,DoGo310,K_D=3.07 n M,表明DoGo310脂质纳米颗粒在同等条件下具有更高的核酸亲和力,因此显示更高的核酸转染效率。继而通过MTS法、动态光散射技术和透射电子显微镜测定DoGo310脂质纳米颗粒的毒性、形貌大小和表面电荷,并结合激光扫描共聚焦显微镜分析和荧光定量PCR分析的方法测定神经细胞靶向si RNA递送效率。细胞毒性结果显示在浓度为120μg/m L时,仍有70%以上的细胞存活;激光粒度与透射电子显微镜结果显示该脂质纳米颗粒具有纳米尺寸,颗粒均匀;电动电势结果显示,表面电荷>30 m V,在溶液中可稳定存在;激光扫描共聚焦显微镜分析和荧光定量PCR结果显示DoGo310脂质纳米微球能够高效转染si RNA到小鼠的原代小胶质细胞和BV2细胞株,诱导RNA干扰,沉默内源基因,并且对神经细胞无毒害作用。综上所述,DoGo310脂质纳米颗粒具有较好的携带并释放核酸的能力,具有神经细胞靶向性,是潜在的可用于基因体内递送的非病毒纳米载体,这也为进一步研究和开发中枢神经系统靶向的核酸载体提供理论依据。