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肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是当今全球危及人类生命的恶性肿瘤之一，其发生、发展机制颇为复杂。既往研究表明肝癌的发生与癌基因激活和抑癌基因失活有关。近来发现肝细胞癌中不仅存在细胞增殖，同时亦存在细胞凋亡，它们与肝癌发生发展相关。但其作用机制及其相互关系尚不十分清楚。p16基因改变是肝细胞癌发生发展的重要因素，原发性肝细胞癌中p16基因的缺失比较普遍，除了缺失和突变以外，最近发现肝细胞癌也存在p16基因的甲基化现象，对于肝癌p16基因甲基化的研究，目前国内报道相对较少，对其在肝细胞癌发生发展中的作用尚有待进一步研究。为此，本实验采用TUNEL、免疫组织化学和PCR方法对35例人体肝细胞癌及其癌旁组织中细胞凋亡、PCNA、P53、Fas和p16基因CpG岛甲基化及其蛋白表达进行了检测。旨在探讨细胞凋亡和增殖及其调控因子P53、Fas表达在肝细胞癌发生、发展中的作用，探讨p16基因甲基化及其蛋白表达对肝细胞癌发生发展的影响，以期为临床治疗提供理论依据。获得以下主要结果和结论： 1．HCC和癌旁组织均显示不同程度的细胞凋亡和PCNA表达，HCC中细胞凋亡指数低，PCNA指数高，而癌旁组织中，两种指数与癌相反。提示HCC中细胞增殖与凋亡的平衡失调，细胞增殖增强，凋亡降低，从而导致HCC的发生和发展。 2．HCC中细胞凋亡和PCNA表达随其病理分级和临床分期增加，细胞凋亡降低，PCNA表达增强。提示细胞凋亡和增殖与肝癌细胞分化和进展相关。 3．HCC中P53阳性表达显著高于癌旁组织，且与HCC分级、分期显著相关，Fas蛋白明显低于癌周组织。提示P53过度表达与HCC细胞分化和浸润转移可能相关，P53阳性HCC，细胞凋亡指数显著降低，而PCNA一LI显著增高，提示P53蛋白过度表达对HCC的细胞增殖可能有促进作用，对其细胞凋亡有一定的抑制作用。FaS阳性HCC细胞凋亡指数显著增高，而PCNA一LI改变不显著，提示Fas蛋白过度表达可促进HCC的细胞凋亡，而对其细胞增殖可能影响不大。 4.肝细胞癌P16甲基化阳性率为31.43%，癌旁肝组织未发现P16甲基化，提示P16基因甲基化是pl6基因失活的途径之一，在肝细胞癌发生中可能具有重要的作用。 5.肝癌组织P16蛋白阳性表达率显著低于癌旁组织，P16蛋白表达与HCC病理分级和临床分期相关，提示P16蛋白低表达有促进肝癌细胞的增殖和恶性转化的作用，p16基因在肝细胞癌分化中起较重要的调控作用。 6.p16发生甲基化的HCC，多呈其蛋白表达缺失，而P16蛋白阳性表达的HCC，多不表现其基因的甲基化。表明肝细胞癌P16基因甲基化与其蛋白表达缺失平行相关，提示肝细胞癌中pl6 CpG岛甲基化是p16基因失活的主要原因，可能是肝细胞癌发生的早期事件。