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目的:探讨激肽释放酶7（KLK7）对卵巢癌发生发展可能的作用机制。方法:收集34例卵巢癌组织和50例正常卵巢组织,使用qRT-PCR以及Western blot技术分别检测组织中KLK7的mRNA及HK7（由KLK7基因编码蛋白）表达情况;qRT-PCR、Western blot方法检测KLK7基因在人卵巢上皮细胞IOSE80和卵巢癌细胞A2780,OVCAR-3,SKOV-3表达情况;后采用瞬时转染si RNA方法干扰卵巢癌细胞A2780,SKOV-3中的KLK7基因,以qRT-PCR以及Western blot方法检测干扰效率;细胞划痕实验测KLK7对癌细胞的迁移能力,CCK8检测KLK7对癌细胞增殖力的影响;以及Transwell实验检测KLK7对癌细胞的侵袭能力,以及流式细胞术检测KLK7对癌细胞凋亡的影响。同时检测Wnt/β-catenin通路相关因子和细胞周期介导因子GSK-3β/p-GSK-3β、β-catenin、p-Rb/Rb、CDK6、CDK4、Cyclin D1的表达。结果:qRT-PCR、Western blot检测卵巢癌组织中KLK7基因的表达情况1.卵巢癌组织和正常卵巢组织中的KLK7基因的mRNA表达水平分别为2.07±0.12,0.70±0.07。两者相比,卵巢癌组中KLK7基因的mRNA表达水平高于正常对照组,差异有统计学意义（t=9.34,P=0.00,P<0.05）。2.卵巢癌组织中的KLK7基因的蛋白表达水平2.13±0.08,正常卵巢组织中的蛋白表达水平0.98±0.08。两者相比,差异有统计学意义（t=10.12,P=0.00,P<0.05）。qRT-PCR、Western blot检测卵巢癌A2780,OVCAR-3,SKOV-3细胞中KLK7基因表达1.卵巢癌A2780,OVCAR-3,SKOV-3细胞和人卵巢上皮细胞IOSE80中的KLK7基因的mRNA表达水平分别为4.86±0.15,1.95±0.04,2.77±0.09,0.93±0.04。A2780细胞中KLK7的mRNA表达水平与IOSE80细胞中KLK7的mRNA表达水平相比,A2780细胞中KLK7的mRNA表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=26.14,P=0.00）;OVCAR-3细胞中KLK7的mRNA表达水平与IOSE80细胞中KLK7的mRNA表达水平相比,OVCAR-3细胞中KLK7的mRNA表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=18.39,P=0.00）;SKOV-3细胞中KLK7的mRNA表达水平与IOSE80细胞中KLK7的mRNA表达水平相比,SKOV-3细胞中KLK7的mRNA表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=18.33,P=0.00）。2.卵巢癌A2780,OVCAR-3,SKOV-3细胞和人卵巢上皮细胞IOSE80中的KLK7基因的蛋白表达水平分别为0.82±0.01,0.59±0.00,0.87±0.00,0.38±0.00。A2780细胞中KLK7的蛋白表达水平与IOSE80细胞中KLK7的蛋白表达水平相比,A2780细胞中KLK7的蛋白表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=32.40,P<0.05）;OVCAR-3细胞中KLK7的蛋白表达水平与IOSE80细胞中KLK7的蛋白表达水平相比,OVCAR-3细胞中KLK7的蛋白表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=35.17,P<0.05）;SKOV-3细胞中KLK7的蛋白表达水平与IOSE80细胞中KLK7的蛋白表达水平相比,SKOV-3细胞中KLK7的蛋白表达水平高于IOSE80细胞中的表达,差异有统计学意义（t=75.94,P<0.05）。qRT-PCR、Western blot法筛选出最有效下调KLK7基因表达的干扰序列1.与control组相比,st-h-KLK7＿003转染48h更加显示出抑制KLK7的mRNA表达的优势（P<0.05）。2.与control组相比,st-h-KLK7＿003转染48h显示出抑制KLK7的蛋白表达的优势（P<0.05）。敲减KLK7基因后对卵巢癌A2780,SKOV-3细胞功能的影响1.细胞划痕实验中,A2780、SKOV-3细胞中,通过对比于对照组,处理组细胞的迁移能力均减低,差异有统计学意义（t=18.54,P=0.00;t=18.47,P=0.00）。2.细胞增殖实验（CCK8实验）中,A2780、SKOV-3细胞中,通过对比于对照组,处理组细胞的增殖能力均减低,差异有统计学意义（P<0.05）。3.Transwell侵袭实验中,A2780、SKOV-3细胞中,通过对比于对照组,处理组的侵袭能力均低,差异有统计学意义（t=11.33,P=0.00;t=13.88,P=0.00）。4.细胞凋亡实验中,A2780、SKOV-3细胞中,通过对比于对照组,处理组细胞的凋亡能力均减低,有统计学差异（t=8.21,P=0.00;t=4.70,P=0.04）。qRT-PCR、Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关因子以及细胞周期介导因子GSK-3β/p-GSK-3β、p-Rb/Rb、β-catenin、CDK6、CDK4、Cyclin D1的表达1.Wnt/β-catenin通路相关因子和细胞周期介导因子p-GSK-3β、β-catenin、p-Rb、CDK6、CDK4、Cyclin D1表达均呈差异性,同时还发现与细胞核中β-catenin的表达呈负相关（P<0.05）。结论:1.在卵巢癌组织及癌细胞系中,与正常对照组比较,实验组中KLK7基因表达增高,表明KLK7可能参与卵巢癌的发生发展。2.敲减KLK7基因后,可抑制卵巢癌细胞的迁移、增殖、侵袭能力,细胞凋亡率升高;表明KLK7在卵巢癌的不断进展过程中发挥着促癌基因的作用。3.KLK7作为肿瘤促进因子,通过影响Wnt/β-catenin信号通路的活性来促进卵巢癌的肿瘤发生和发展,可能成为卵巢癌患者预后不良的潜在生物标志物,为卵巢癌治疗方向提供新的思路。