艾滋病是一种病死率极高的严重传染病，具有传播速度快、死亡人数多、流行范围广、造成危害大等特点。艾滋病是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的，HIV分为HIV—1及HIV—2两型，艾滋病多由HIV—1型引起。HIV—1基因具有高度变异性，其在传播过程中可产生许多亚型(Subtype)，这些亚型均具有相对独立的核苷酸序列。HIV分子流行病学的研究，特别是鉴定感染人群中HIV—1亚型的型别，对于追踪传染源、了解传播途径、控制疫情蔓延、建立治疗方案以及疫苗研究意义重大。近年来，陕西省HIV呈加速流行及蔓延的趋势。本课题用PCR对15份陕西HIV—1感染者外周血单核细胞(PBMCs)样本进行扩增，获得HIV—1env基因的核酸片段，对其C2—V3及邻区350-450个核苷酸序列进行分 t·fkkt4＋ttWA 忻，所得结果与HIV国际标准株及周边省份流行株进行比较，分析共享 序列及突变序列，制作系统树，计算离散率。结果表明，陕西HIV刁流 行株主要为B、E、C亚型，在性乱人群中主要流行B亚型，在静脉注射 吸毒和职业供血人群中主要流行E、C亚型。传播来源可能为国外或周边 省份传入。此研究将为陕西省门 的预防、控制及感染者治疗提供有力 的依据。 目前常用的 HIV－1亚型分析方法存在一些 lh］题，如血清学方法、异 源双链泳动法特异性及敏感性较差；基回序列分析法虽然准确性和特异 性较好，但存在操作过程复杂、设备要求高、成本高、比较费时、不能 并行处理多个样本等问题。新兴的基因芯片技术因具有操作简单、自动 化程度高、检测靶分子种类多、成本低、效率高、结果客观性强等特点， 在疾病诊断中得到日益广泛的应用，也为HIV刁亚型分析提供了新的思 路和途径。本课题将＊V－111个亚型及IJIV－2 env基因CZ一V3区一 段核昔酸序列，用芯片点样机点样于经预处理的玻片，制备成HIV亚型 分析基因芯片，并用其对15份HIV阳性样本进行亚型分析，所得结果与 其他亚型分析方法（血清学、异源双链泳动、基因序列分析法）进行比 较，评价几种方法的优劣。发现制备的基因芯片敏感性高、特异性好，回 所得结果与目前通用的基因序列分析法所得结果完全符合，并且具有操 作简单、省时、价廉、适用于大规模的样品分析、拓展使用前景广阔等回 优点。 在HIV分子流行病学研究的过程中，找们发观了一例与HIV感染者 长期无保护的性行为未引发感染的特殊案例。万某（女，陕西人）2000 年7月因高热、呼吸困难入住陕西某医院。临床表现为HIV感染典型症 状。初筛试验用酶联免疫吸附（ELISA）试验及明胶颗粒凝集（PA）试 验检测 fllV—l抗体及 IllV—2抗体，确认试验用蛋白免疫印迹（WB）试 第3页 共82页 第·军区＾磅傅＊时’～式 验检测HIV—l抗体及HIV—2抗体。结果表明，j］某血样ELISA试验结 果HIV—l抗体阳性，HIV—2抗体阴性。复检结果相同。PA试验结果HIV —1阳性。WB试验出现HIV—l特异性条带gP160、gP120、P66、P55、 gP4 1． P31、P24、P17，无HIV一2特异性条带出现。认定为HIV一l抗体 阳性，HIV—2抗体阴性。张某（万某丈夫）血样ELISA试验显示门V—l 抗体及 HIV—2抗体均为阴性，PA试验结果阴性。3 个月、6个月及 1卜 年后复查，巳HA、叩试验结果仍为阴性。按照《全国艾滋病检测工作 规范》中HIV—l抗体初筛及确认的标准，根据实验室检测结果及临床症 状表现，我们确认万某为HIV感染者，张某为非感染者。张某未回与力 某长期无保护性接触而感染HIV，经查新为我国首例报道。 从万某血样成功分离获得了HIV习毒株，对正常人淋巴细胞及张某 的淋巴细胞进行体外病毒攻击试验，结果表明，正常人淋巴细胞自病毒 攻击后2周开始，显微镜可观察到HIV习感染特有的细胞病变，逆转录 酶的活性检测结果为阳性，P24抗原检测结果阳性，表明HIV－1侵入细 胞。张某的淋巴细胞经HIV－1攻击后显微镜下观察始终未见HIV－1感染 特有的细胞病变，逆转录酶的活性检测结果为阴性，P24抗原检测结果 为阴性，表明！IIV刁病毒未能侵入细胞。对张某CCRS基因进行了检测，回 发现为随机发生的CCRS凸32基因纯合子灾变，在此之前我国未发现 CCRS凸32纯合子突变，仅发现过杂合于夹变，并且突变儿率很低，而0 CCRS凸32基因杂合于突变个体可以被HIV感?